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fanwq258

木虫 (正式写手)

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[交流] T载体连接不上去

自己扩增的基因，连接T载体就是连不上，但是买载体时带的插入片段可以连接上，这可该怎么办呢？

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1楼 2013-08-05 09:53:35

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fanwq258

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引用回帖:

5楼: Originally posted by flyhigh805 at 2013-08-05 17:16:03
你的目的片段大小是多少啊，太大的话连T载可能有点困难，但是只要优化连接条件连上去应该很容易的。应尝试提高PCR产物的浓度，可以取少量PCR产物电泳检测如果大小正确的话剩下的PCR产物直接过胶回收的柱子，这样得到 ...

我的目的片段也就是800多，浓度在25ng/UL左右，买载体是带的片段也就700多bp，浓度是50ng/UL，我就是按照自带片段的浓度加的，可是就是连接不上