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SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题
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做的是娃哈哈乳饮料的蛋白质测定，直接从买来的乳饮料中取样跑电泳。用的是15%的分离胶和5%的浓缩胶，但是跑出来的marker只有三条带，而且颜色非常淡，样品跑出来条带拖尾，非常不理想，请问是什么原因呢？？？求指导那，跑了三四次都这样，试剂溶液都是新配的，marker也是新买的。 201307243056.jpg |
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spaceman_jia 
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貌似protocol应该没有区别。 关键AP要新配，附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。 我通常整块胶1个小时左右就完成了（10x8cm小胶，0.75或1mm厚不到一个小时，1.5mm厚会多等等），也可妥善保存过夜再用但不推荐。 加大用量会让聚合度下降，尽管可以凝固。 我喜欢现用现配，上午制胶跑胶，下午可以染色(快染法2hr就出结果）或Western。 如果用旧的AP通常要凝结好几个小时，甚至过夜，而且效果会变差。 |
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