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SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题
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樱花稀砂
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SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题
做的是娃哈哈乳饮料的蛋白质测定,直接从买来的乳饮料中取样跑电泳。用的是15%的分离胶和5%的浓缩胶,但是跑出来的marker只有三条带,而且颜色非常淡,样品跑出来条带拖尾,非常不理想,请问是什么原因呢???求指导那,跑了三四次都这样,试剂溶液都是新配的,marker也是新买的。
201307243056.jpg
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1楼
2013-07-27 17:24:34
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樱花稀砂
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8楼
:
Originally posted by
冷眼倦天涯
at 2013-07-28 10:54:41
拖尾应该是电压问题,你的电压是多少?都是新配的试剂AP,TEMED的量注意一下,查一下相关文献试试看。
浓缩胶的时候电压是10Am,分离胶的时候电压是20Am,高了吗?
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9楼
2013-07-28 11:29:18
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spaceman_jia
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2013-07-27 22:17:16
樱花稀砂: 金币+5,
★★★
很有帮助
2013-07-28 19:11:17
你的染色看起来怪怪的,是G-250吗
别直接用饮料原液,跑蛋白样品需要纯化。可以选多种方法,如TCA沉淀,稀释后超滤离心等。电泳之前测一下浓度再上样。
关于marker,你可以跑一个空胶,只上marker看看。如果电泳本身ok,没有样品的情况下,marker可能会宽一些,但其他都应该正常。
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2楼
2013-07-27 21:05:59
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Sthunder
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2013-07-27 22:17:26
ladder很淡,应该是load量不够,至于样品拖尾的话,一般可以降低电压,信新配running buffer来避免!
Good luck
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互助互励,共奋共进!!
3楼
2013-07-27 21:21:53
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3楼
:
Originally posted by
Sthunder
at 2013-07-27 21:21:53
ladder很淡,应该是load量不够,至于样品拖尾的话,一般可以降低电压,信新配running buffer来避免!
Good luck
ok,谢谢哦
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4楼
2013-07-27 21:48:43
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