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空蓝Y劫

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[求助] SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用

SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用前要煮沸吗？如果煮了会对电泳有什么影响？

本人新手，刚接触凝胶电泳，听说Marker，是蛋白，严禁煮沸。不小心煮了下。结果也没见什么不好啊！

还有接着做westen blot 实验的时候老师说该出标记的Marker 位置没出标记。是不是我煮了marker的原因？

但其他出标记的样有的因为是菌体的原因，上样前也有煮沸过啊，为什么它们出标记了煮的Marker不出标记呢？？

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1楼2011-07-22 12:55:32

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空蓝Y劫

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我想问的是：

1.SDS-PAGE电泳时Marker煮沸与否对电泳结果有无影响，若有，有何种影响。

2.westen blot实验中硝酸纤维素膜上是否出现电泳条带与蛋白是否变性有无关系。

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2楼2011-07-22 13:16:37

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雪山飞狐7233

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★ ★
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引用回帖:

Originally posted by 空蓝Y劫 at 2011-07-22 12:55:32:
SDS-PAGE 凝胶电泳的Marker使用前要煮沸吗？如果煮了会对电泳有什么影响？

本人新手，刚接触凝胶电泳，听说Marker，是蛋白，严禁煮沸。不小心煮了下。结果也没见什么不好啊！

还有接着做westen blot 实验的 ...

蛋白电泳分变性电泳和非变性电泳，SDS-PAGE 本身就是电泳，所以电泳样品和marker要经过变性处理（通常就是100度，10min）。但是现在有预染的marker，已经处理完毕了，而且在电泳的时候能过在胶上看到相应的分子量条带。然而普通的marker就需要经过变性处理了。

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