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【求助/交流】SDS-PAGE凝胶电泳胶的详细制备方法
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| SDS-PAGE凝胶电泳胶的详细制备方法 |
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rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-29 17:35:12
August893(金币+1): 2011-03-30 15:13:26
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August893(金币+1): 2011-03-30 15:13:26
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2楼2010-12-29 11:16:55
August893(金币+1): 2011-03-30 15:13:30
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3楼2010-12-29 11:32:06
4楼2011-01-14 22:00:07
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rainwander(金币+3):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-15 22:07:56
rainwander(金币+3):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-15 22:07:56
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个人觉得那本书有点儿老了,过时了 以下是我个人查资料得出的,也是自己做实验要用的。可以参考一下,不过我觉得你还是要多查文献,与你要做内容相关的文献,还是很有用的。 (1) 30%丙烯酰胺(Acr)溶液:称Acr 30g,甲叉双丙烯酰胺(Bis)0.8g,加纯水至100mL 4℃棕色瓶保存(1-2个月) (2) 10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液:称SDS 10g,加纯水至100mL,室温保存 (3) 10%过硫酸铵(AP)溶液:称AP 1g,加纯水至10mL,-20℃保存 (4) 1.5mol/L pH8.8 Tris-HCl缓冲液:称取Tris 181.71g,加入800mL水,用1mol/L盐酸调pH8.8, 最后定容至1L (5) 0.5mol/L pH6.8 Tris-HCl缓冲液:称取Tris12.1g,加入150mL水,用1mol/L盐酸调pH6.8, 最后用蒸馏水定容至200mL (6) 1.0mol/L pH6.8 Tris-HCl缓冲液:称取Tris12.1g,加入50mL水,用1mol/L盐酸调pH6.8, 最后用蒸馏水定容至100mL。 (7) TEMED:N,N,N',N'-四甲基乙二胺; DTT:二硫苏糖醇(DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。由于容易被空气氧化,因此DTT的稳定性较差;但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命) (8) 12%变性聚丙烯酰胺凝胶溶液:现用现配 试剂组成 100mL 30%丙烯酰胺(mL) 40 Tris-HCL 1.5M pH8.8(mL) 25 10% SDS(mL) 1 超纯水(mL) 33 TEMED(μL) 40 10%过硫酸铵(mL) 1 (9) 4%变性聚丙烯酰胺凝胶溶液:现用现配 试剂组成 5mL 30%丙烯酰胺(mL) 0.67 Tris-HCL 0.5M pH6.8(mL) 0.63 10% SDS(mL) 0.05 超纯水(mL) 3.6 TEMED(μL) 5 10%过硫酸铵(mL) 0.05 (10) 5*上样缓冲液:4℃保存 试剂组成 10mL Tris-HCL 1.0M pH6.8(mL) 2.5 甘油(mL) 5 SDS(g) 1 超纯水(mL) 溴酚蓝 痕量 (10)10*电极缓冲液: 试剂组成 1L 甘氨酸(g) 2.5 Tris(g) 5 SDS(g) 1 超纯水(mL) 室温保存,使用时取100 mL,另加10 mL 10% SDS定容至1L,可重复用3-5次 |
5楼2011-01-15 19:08:41











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