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brucewill

金虫 (小有名气)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳-marker和样品中溴酚蓝-都在点样孔中不动

大家好,昨天在做聚丙烯酰胺凝胶电泳,跑蛋白的时候,发现点样孔中的marker(预染),以及样品缓冲液中的溴酚蓝,都停留在点样孔中,将恒电压设为30V,80V,120V,都不行,还是在原位置没有移动,不知是什么原因,求解释!
      细节:拔下梳子后,在空气中放置了30min,不知这是否有影响?
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-01-13 08:43:57
电泳液不是使用浓度,错误地用了5倍的母液。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2012-01-13 02:41:47
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普通回帖

ecolibl21

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 确实,仪器要考虑下 2012-01-10 18:08:38
brucewill(金币+3): 有帮助 2012-01-10 18:15:14
我认为无影响。
考虑:
1如果是预制胶看看胶底下的膜有没有撕下来,如果没有,可能会形成断路,样品走不下去。
2样品走不下来主要考虑断路问题,看看电泳仪是否有问题。
PCR发明人穆利斯的成功表明,想象力推动进步
2楼2012-01-10 11:17:40
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2012-01-10 18:08:48
brucewill(金币+3): 2012-01-10 18:15:23
拔下梳子放空气中,我也做过,没多大影响;你电极液的配方是什么,还有检查电路,如果电路通的话里面会有很多微小的气泡,如果没有气泡有可能是电路不通,我的电泳槽就是这么判断的
因为这个世界上这么多的狼,我这只牧羊犬只好放弃我的温顺,向着这个世界放出最耀眼的光。
3楼2012-01-10 12:47:59
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
brucewill(金币+2): 2012-01-12 22:40:43
可能接反了,也有可能是产生了断路,电泳槽出了问题
4楼2012-01-11 22:39:03
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
brucewill(金币+1): 2012-01-12 22:40:51
断路了!检查电泳槽吧
5楼2012-01-12 11:25:15
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
brucewill(金币+1): 2012-01-12 22:40:57
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-01-13 08:43:47
你制胶的时候是不是把底下封上了啊,然后你跑电泳的时候没有揭开啊,这样内外槽就断路了啊
6楼2012-01-12 21:27:23
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zmchail

金虫 (小有名气)

测试一下缓冲溶液的PH,然后检查电路。
8楼2012-01-13 15:37:01
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naitou

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by da1234mao at 2012-01-11 22:39:03:
可能接反了,也有可能是产生了断路,电泳槽出了问题

接反了是往上跑的,我试过
9楼2012-01-15 11:18:05
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)


同意以上观点!要么接反了,要么过载断路了。。。
10楼2012-01-15 17:49:30
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