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海王之心2751

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

我用的分离胶15%,浓缩胶5%,前一天配胶,第二天跑电泳,第二天拔出梳子时,发现浓缩胶会缩短,上样槽缩短一半,导致不能上足够的样,浓缩胶有灌满。请问我的浓缩胶为什么会收缩这么严重?
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为梦想努力拼搏!
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gchjason

铁虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-21 09:50:59
浓缩胶在凝固的时候以及放在冰箱中保存的时候都会收缩的。我做的时候一般都是在浓缩胶凝固时一直盯着,看少了就补加,直到完全凝固好。另外不建议第一天做胶,第二天用,这样常会出现很多问题,胶的质量会不好。我一般都是做完胶直接就跑。
Keep your friends close,but keep your enemies closer.
2楼2013-04-17 11:45:28
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乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-21 09:51:08
做了个胶放了一天慢就很明显的收缩了,应该是时间有点久了,一般做胶都是头天晚上做好,第二天一来就开始用,感觉没什么问题~
一花一世界、一叶一菩提
3楼2013-04-17 11:53:53
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ptzhyding06

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-21 09:51:17
那个你前一天做完胶之后是怎么保存的呢,一般都是要保持湿润的吧 我自己做的有时候放在塑料手套里面加点缓冲溶液放4度之后2-4天之后都可以用的
4楼2013-04-17 13:26:09
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
海王之心2751(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-05-01 18:52:53
凝胶放久了都会收缩,你要是第二天用的话建议你用保鲜膜包上放到4℃里面保存,这样能好一些。
5楼2013-04-21 01:34:11
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sl35537417

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


海王之心2751(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2013-05-01 18:53:04
同意楼上  我们也一直这样做 没有问题;收缩是因为水分蒸发了一部分 除了加样孔处的胶  其他部分完全没有问题
6楼2013-04-21 08:49:47
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panyuzhu

禁虫 (小有名气)


海王之心2751(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-01 18:53:21
本帖内容被屏蔽

7楼2013-04-21 10:14:13
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飞飞050227

金虫 (小有名气)


海王之心2751(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-01 18:53:35
引用回帖:
2楼: Originally posted by gchjason at 2013-04-17 11:45:28
浓缩胶在凝固的时候以及放在冰箱中保存的时候都会收缩的。我做的时候一般都是在浓缩胶凝固时一直盯着,看少了就补加,直到完全凝固好。另外不建议第一天做胶,第二天用,这样常会出现很多问题,胶的质量会不好。我一 ...

啊?第一天制完的胶第二天跑会有什么影响呢?我每次都是这样干的……不知道实验不顺利是不是这个原因造成的,但是染胶后条带很清楚锐利啊,不是说制完胶最好要充分聚合之后再跑么。
生命不息,实验不止!
8楼2013-05-01 15:55:44
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般最好就是配好了直接用
如果不是直接用 就要保证不缩水影响结果  所以应该用滤纸包好后润湿全部  然后放在冰箱4°  就不会有问题了
做出色的科研人
9楼2013-05-01 19:31:52
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

配置好之后应该要用保鲜膜和少许电泳液包起来
放在冰箱保存。
要不水分蒸发,很容易变小
10楼2013-05-02 12:29:15
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