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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 聚丙烯酰胺凝胶电泳-marker和样品中溴酚蓝-都在点样孔中不动
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brucewill

金虫 (小有名气)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳-marker和样品中溴酚蓝-都在点样孔中不动

大家好，昨天在做聚丙烯酰胺凝胶电泳，跑蛋白的时候，发现点样孔中的marker（预染），以及样品缓冲液中的溴酚蓝，都停留在点样孔中，将恒电压设为30V,80V,120V，都不行，还是在原位置没有移动，不知是什么原因，求解释！
      细节：拔下梳子后，在空气中放置了30min，不知这是否有影响？
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1楼 2012-01-10 10:12:29
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-01-13 08:43:57
电泳液不是使用浓度，错误地用了5倍的母液。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2012-01-13 02:41:47
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普通回帖

ecolibl21

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 确实，仪器要考虑下 2012-01-10 18:08:38
brucewill(金币+3): ★有帮助 2012-01-10 18:15:14
我认为无影响。
考虑：
1如果是预制胶看看胶底下的膜有没有撕下来，如果没有，可能会形成断路，样品走不下去。
2样品走不下来主要考虑断路问题，看看电泳仪是否有问题。
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PCR发明人穆利斯的成功表明，想象力推动进步
2楼2012-01-10 11:17:40
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痴客

木虫 (正式写手)

吃货250

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2012-01-10 18:08:48
brucewill(金币+3): 2012-01-10 18:15:23
拔下梳子放空气中，我也做过，没多大影响；你电极液的配方是什么，还有检查电路，如果电路通的话里面会有很多微小的气泡，如果没有气泡有可能是电路不通，我的电泳槽就是这么判断的
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因为这个世界上这么多的狼，我这只牧羊犬只好放弃我的温顺，向着这个世界放出最耀眼的光。
3楼2012-01-10 12:47:59
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
brucewill(金币+2): 2012-01-12 22:40:43
可能接反了，也有可能是产生了断路，电泳槽出了问题
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4楼2012-01-11 22:39:03
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
brucewill(金币+1): 2012-01-12 22:40:51
断路了！检查电泳槽吧
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5楼2012-01-12 11:25:15
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YJD落叶梧桐

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
brucewill(金币+1): 2012-01-12 22:40:57
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2012-01-13 08:43:47
你制胶的时候是不是把底下封上了啊，然后你跑电泳的时候没有揭开啊，这样内外槽就断路了啊
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6楼2012-01-12 21:27:23
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zmchail

金虫 (小有名气)
测试一下缓冲溶液的PH，然后检查电路。
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8楼2012-01-13 15:37:01
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naitou

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by da1234mao at 2012-01-11 22:39:03:
可能接反了，也有可能是产生了断路，电泳槽出了问题

接反了是往上跑的，我试过
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9楼2012-01-15 11:18:05
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)
同意以上观点！要么接反了，要么过载断路了。。。
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10楼2012-01-15 17:49:30
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