[求助] SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题

3楼: Originally posted by Sthunder at 2013-07-27 21:21:53
ladder很淡，应该是load量不够，至于样品拖尾的话，一般可以降低电压，信新配running buffer来避免！
Good luck

2楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-27 21:05:59
你的染色看起来怪怪的，是G-250吗
别直接用饮料原液，跑蛋白样品需要纯化。可以选多种方法，如TCA沉淀，稀释后超滤离心等。电泳之前测一下浓度再上样。
关于marker，你可以跑一个空胶，只上marker看看。如果电泳本 ...

8楼: Originally posted by 冷眼倦天涯 at 2013-07-28 10:54:41
拖尾应该是电压问题，你的电压是多少？都是新配的试剂AP，TEMED的量注意一下，查一下相关文献试试看。

6楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-27 22:05:18
染色液重配一下吧，颜色太浅了。
AP，TEMED不要多加，用量严格按照protocol
我个人习惯都是用新配的试剂盒缓冲液，包括AP都是从固体新配的，电泳缓冲液也不重复用。
可能极端了一点，但效果很好。...

11楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-28 14:19:00
貌似protocol应该没有区别。
关键AP要新配，附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。
我通常整块胶1个小时左右就完成了（10x8cm小胶，0.75或1mm厚不到一个小时，1.5mm厚会多等等），也可妥善保存过夜再用但 ...

12楼: Originally posted by 冷眼倦天涯 at 2013-07-28 15:42:45
我都是用电压跑的，浓缩胶80V，分离胶110V。10mA，电流的没用过，不好意思了...

14楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-28 17:01:43
楼主可以按照12楼的恒电压方法试试。
注意控制温度，别吝惜用冰块。