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SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题
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做的是娃哈哈乳饮料的蛋白质测定,直接从买来的乳饮料中取样跑电泳。用的是15%的分离胶和5%的浓缩胶,但是跑出来的marker只有三条带,而且颜色非常淡,样品跑出来条带拖尾,非常不理想,请问是什么原因呢???求指导那,跑了三四次都这样,试剂溶液都是新配的,marker也是新买的。 201307243056.jpg |
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spaceman_jia
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-29 11:10:52
gyesang: 回帖置顶 2013-07-29 11:10:54
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gyesang: 回帖置顶 2013-07-29 11:10:54
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貌似protocol应该没有区别。 关键AP要新配,附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。 我通常整块胶1个小时左右就完成了(10x8cm小胶,0.75或1mm厚不到一个小时,1.5mm厚会多等等),也可妥善保存过夜再用但不推荐。 加大用量会让聚合度下降,尽管可以凝固。 我喜欢现用现配,上午制胶跑胶,下午可以染色(快染法2hr就出结果)或Western。 如果用旧的AP通常要凝结好几个小时,甚至过夜,而且效果会变差。 |
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2013-07-28 13:45:31, 96.83 K
11楼2013-07-28 14:19:00
spaceman_jia
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Sthunder
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