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spaceman_jia

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★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-07-29 11:10:52
gyesang: 回帖置顶 2013-07-29 11:10:54
引用回帖:
10楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 13:23:07
可以请教一下配胶的方案吗?我怕我的错了,按方案上的AP和TEMED的量胶总是不凝,多加了才能凝...

貌似protocol应该没有区别。
关键AP要新配,附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。
我通常整块胶1个小时左右就完成了(10x8cm小胶,0.75或1mm厚不到一个小时,1.5mm厚会多等等),也可妥善保存过夜再用但不推荐。
加大用量会让聚合度下降,尽管可以凝固。
我喜欢现用现配,上午制胶跑胶,下午可以染色(快染法2hr就出结果)或Western。
如果用旧的AP通常要凝结好几个小时,甚至过夜,而且效果会变差。

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  • 附件 1 : Protocol#1-SDS-PAG(1).pdf
  • 2013-07-28 13:45:31, 96.83 K
11楼2013-07-28 14:19:00
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冷眼倦天涯

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 11:29:18
浓缩胶的时候电压是10Am,分离胶的时候电压是20Am,高了吗?...

我都是用电压跑的,浓缩胶80V,分离胶110V。10mA,电流的没用过,不好意思了
12楼2013-07-28 15:42:45
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冷眼倦天涯

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 13:23:07
可以请教一下配胶的方案吗?我怕我的错了,按方案上的AP和TEMED的量胶总是不凝,多加了才能凝...

我有一个制胶的方案,需要的话可以发给你
13楼2013-07-28 15:46:47
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spaceman_jia

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

楼主可以按照12楼的恒电压方法试试。
注意控制温度,别吝惜用冰块。
14楼2013-07-28 17:01:43
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sometimess

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看起来严重弥散了,应该是胶凝结的问题,注意一下你配胶时间过硫酸铵没有潮解吧,夏天容易出现这个问题,
15楼2013-07-28 17:09:20
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樱花稀砂

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-28 14:19:00
貌似protocol应该没有区别。
关键AP要新配,附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。
我通常整块胶1个小时左右就完成了(10x8cm小胶,0.75或1mm厚不到一个小时,1.5mm厚会多等等),也可妥善保存过夜再用但 ...

AP一直是先用先配的,非常感谢,明天继续做一下!谢谢啦
16楼2013-07-28 18:49:13
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樱花稀砂

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 冷眼倦天涯 at 2013-07-28 15:42:45
我都是用电压跑的,浓缩胶80V,分离胶110V。10mA,电流的没用过,不好意思了...

恩呢,好的,谢谢
17楼2013-07-28 18:50:34
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樱花稀砂

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
14楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-28 17:01:43
楼主可以按照12楼的恒电压方法试试。
注意控制温度,别吝惜用冰块。

用的电压,浓缩胶80V,分离胶110V吗?
18楼2013-07-28 19:02:40
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spaceman_jia

捐助贵宾 (小有名气)


引用回帖:
18楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 19:02:40
用的电压,浓缩胶80V,分离胶110V吗?...

这是很常见的条件。
我想最大问题可能还是样品。饮料很复杂,分析蛋白还需纯化。
19楼2013-07-28 21:05:44
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和龟赛跑的人

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 11:29:18
浓缩胶的时候电压是10Am,分离胶的时候电压是20Am,高了吗?...

一块板的话高了
20楼2013-07-29 16:24:12
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