应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE凝胶电泳跑出来的条带问题
212/3返回列表上一页123下一页
查看: 6645  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

spaceman_jia

捐助贵宾 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-07-29 11:10:52
gyesang: 回帖置顶 2013-07-29 11:10:54
引用回帖:
10楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 13:23:07
可以请教一下配胶的方案吗？我怕我的错了，按方案上的AP和TEMED的量胶总是不凝，多加了才能凝...

貌似protocol应该没有区别。
关键AP要新配，附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。
我通常整块胶1个小时左右就完成了（10x8cm小胶，0.75或1mm厚不到一个小时，1.5mm厚会多等等），也可妥善保存过夜再用但不推荐。
加大用量会让聚合度下降，尽管可以凝固。
我喜欢现用现配，上午制胶跑胶，下午可以染色(快染法2hr就出结果）或Western。
如果用旧的AP通常要凝结好几个小时，甚至过夜，而且效果会变差。
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : Protocol#1-SDS-PAG(1).pdf
    • 2013-07-28 13:45:31, 96.83 K
11楼2013-07-28 14:19:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冷眼倦天涯

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 11:29:18
浓缩胶的时候电压是10Am，分离胶的时候电压是20Am，高了吗?...

我都是用电压跑的，浓缩胶80V，分离胶110V。10mA，电流的没用过，不好意思了
赞一下 回复此楼
12楼2013-07-28 15:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冷眼倦天涯

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 13:23:07
可以请教一下配胶的方案吗？我怕我的错了，按方案上的AP和TEMED的量胶总是不凝，多加了才能凝...

我有一个制胶的方案，需要的话可以发给你
赞一下 回复此楼
13楼2013-07-28 15:46:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spaceman_jia

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主可以按照12楼的恒电压方法试试。
注意控制温度，别吝惜用冰块。
赞一下 回复此楼
14楼2013-07-28 17:01:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sometimess

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看起来严重弥散了，应该是胶凝结的问题，注意一下你配胶时间过硫酸铵没有潮解吧，夏天容易出现这个问题，
赞一下 回复此楼
15楼2013-07-28 17:09:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花稀砂

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-28 14:19:00
貌似protocol应该没有区别。
关键AP要新配，附件中等20min让分离胶初步凝固已经算保守了。
我通常整块胶1个小时左右就完成了（10x8cm小胶，0.75或1mm厚不到一个小时，1.5mm厚会多等等），也可妥善保存过夜再用但 ...

AP一直是先用先配的，非常感谢，明天继续做一下！谢谢啦
赞一下 回复此楼
16楼2013-07-28 18:49:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花稀砂

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 冷眼倦天涯 at 2013-07-28 15:42:45
我都是用电压跑的，浓缩胶80V，分离胶110V。10mA，电流的没用过，不好意思了...

恩呢，好的，谢谢
回复此楼
17楼2013-07-28 18:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

樱花稀砂

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by spaceman_jia at 2013-07-28 17:01:43
楼主可以按照12楼的恒电压方法试试。
注意控制温度，别吝惜用冰块。

用的电压，浓缩胶80V，分离胶110V吗？
赞一下 回复此楼
18楼2013-07-28 19:02:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spaceman_jia

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 19:02:40
用的电压，浓缩胶80V，分离胶110V吗？...

这是很常见的条件。
我想最大问题可能还是样品。饮料很复杂，分析蛋白还需纯化。
赞一下 回复此楼
19楼2013-07-28 21:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

和龟赛跑的人

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 樱花稀砂 at 2013-07-28 11:29:18
浓缩胶的时候电压是10Am，分离胶的时候电压是20Am，高了吗?...

一块板的话高了
回复此楼
20楼2013-07-29 16:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 樱花稀砂 的主题更新
212/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 广西大学-广州大学招聘博士后 欢迎广大优秀人才！！！ +5 SCSIOyxguo 2026-09-03 8/400 2026-09-06 15:06 by 可爱小花朵
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 13:09 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:29 by eObJPa4gWmp6
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 7/350 2026-09-06 11:40 by eObJPa4gWmp6
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 7/350 2026-09-06 11:20 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 7/350 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 07:20 by E1iiBLMU2XnD
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 7ZYIEW2YWn72 2026-09-04 9/450 2026-09-06 06:00 by E1iiBLMU2XnD
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 CRJ0Aq2FtVH0 2026-09-03 15/750 2026-09-06 05:48 by E1iiBLMU2XnD
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 5/250 2026-09-06 02:39 by E1iiBLMU2XnD
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 5/250 2026-09-06 02:19 by E1iiBLMU2XnD
[基金申请] 面上没中，邀请各位路过的虫友分析一下分数 +12 jackleilei 2026-09-03 13/650 2026-09-05 18:10 by fireguard
[文学芳草园] 两块石头 +6 阿美_Lml888 2026-09-03 8/400 2026-09-05 13:52 by 阿美_Lml888
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +6 瞬息宇宙 2026-08-31 9/450 2026-09-05 13:11 by haizai99
[硕博家园] Ei源刊怎么投 +4 Fengshun9711 2026-09-04 4/200 2026-09-04 19:30 by 研途知予
[硕博家园] 哈尔滨工业大学韩晓军教授课题组招收2027年硕士推免生及博士研究生 +3 灯灯灯灯DDDD 2026-09-03 3/150 2026-09-03 21:22 by 科研皮皮猪
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭