| 查看: 922 | 回复: 4 | |||
[求助]
重组蛋白不挂his柱
|
| 急求解决：我最近在纯化一个61K的蛋白，用PET32a/BL21的，在包涵体中表达，我用8M urea溶不掉，我就在里面加β-ME（1mM），好在是融了，但不挂NTA的柱子，求各位高见，本人不胜感激啊？我是用含20-500mM Imid 的Ttis-hcl 8.0 500mM Nacl 分布洗脱了，结果分析目标蛋白在流穿里面，而且比较纯……只是拿不到啊，我还专门用硫酸铵沉淀流穿，也拿不到（含有大量核酸），还有我纯化的另一个蛋白在上清里面（55k，表达量不高，），它是乎能和柱子结合（和之前挂不上的柱子是同一批买的），但也有问题：20-500mM Imid 的PBS 7.4 500mM Nacl 洗脱，目标蛋白在20, 100, 500mM Imid 洗脱液洗脱时出现，但杂蛋白很多，同求指导，万分焦急…… |
回复此楼» 猜你喜欢
材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分
已经有5人回复
-
085600 286分 材料求调剂
已经有6人回复
-
086502化学工程342求调剂
已经有4人回复
-
材料求调剂一志愿哈工大324
已经有7人回复
-
328求调剂
已经有7人回复
-
340求调剂
已经有5人回复
-
一志愿南昌大学324求调剂
已经有4人回复
-
求调剂推荐 材料 304
已经有15人回复
-
291求调剂
已经有19人回复
-
331环境科学与工程求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 毕赤酵母表达蛋白纯化
已经有10人回复
- 蛋白纯化Ni-IDA柱子出现问题
已经有20人回复
- HIS标签的蛋白不挂柱，求助
已经有6人回复
- 原核表达载体蛋白诱导
已经有18人回复
- 蛋白质的Ni柱纯化问题
已经有23人回复
- His Tag融合蛋白纯化
已经有8人回复
- His标签的蛋白纯化柱子
已经有10人回复
- 带HIS标签的可溶蛋白的纯化问题
已经有20人回复
- 镍柱纯化带his标签的蛋白，柱堵了
已经有6人回复
- 关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况
已经有17人回复
- 过带his标签的蛋白时镍柱上样后颜色变棕色是怎么回事
已经有17人回复
- 关于带his-tag的膜蛋白镍柱纯化
已经有10人回复
- 已经带his标签目的蛋白基因如何设计引物啊（目的基因已经接在pET-22b的载体上了）
已经有8人回复
- 融合蛋白不挂柱，急！
已经有7人回复
- 想给自己的蛋白加个HIS标签？方法。。。。
已经有8人回复
- 目的蛋白加myc或his标签？
已经有10人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 【求助/交流】关于his-tagged 蛋白纯化
已经有9人回复
- 【求助/交流】蛋白不挂柱怎么办
已经有11人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2013-08-05 10:17:50
zhangbighui
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1468.9
- 红花: 4
- 帖子: 322
- 在线: 49.9小时
- 虫号: 2564731
- 注册: 2013-07-25
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2013-08-05 10:40:02
4楼2013-08-12 08:53:26
5楼2013-08-12 08:54:53
