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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白不挂柱怎么办
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zyflf

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白不挂柱怎么办已有9人参与

蛋白不挂柱怎么办

his标签，Ni柱，用的Ni-NTA纯化树脂。蛋白51KD，pI9.21，是一种丙酮酸转移酶。过柱后跑胶发现蛋白没了。

麻烦各位帮忙解决一下

[ Last edited by zyflf on 2010-8-27 at 15:52 ]
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1楼2010-08-27 11:07:54
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zhangjingfei01

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
问题详细点，比如蛋白特性？柱子类型？
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2楼2010-08-27 11:13:57
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henkally

禁虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
3楼2010-08-27 11:19:02
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jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
9494，什么柱子，怎么表达的蛋白，有什么标签，一概不知啊
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4楼2010-08-27 11:29:16
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-08-27 11:29:16:
9494，什么柱子，怎么表达的蛋白，有什么标签，一概不知啊

柱子，标签，蛋白溶解buffer
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5楼2010-08-27 11:58:20
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有无标签，挂什么柱子。蛋白大小、pI和所用buffer
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6楼2010-08-27 13:25:42
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
7楼2010-08-27 14:23:24
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zyflf

木虫 (正式写手)
his标签，Ni柱，用的Ni-NTA纯化树脂。蛋白45KD，是一种丙酮酸转移酶。过柱后跑胶发现蛋白没了。

麻烦各位帮忙
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8楼2010-08-27 15:42:58
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
binding buffer 的成分，pH？
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9楼2010-08-27 16:00:16
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
★ ★
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silicare(金币+1):谢谢分享 2010-08-27 20:47:14
Ni离子是已经螯合在柱子上还是每次得自己螯合？
如果需要自己螯合，建议每次新鲜配制上柱
查查文献有没有纯化过类似蛋白。
我上次纯化一个蛋白不挂柱最后查文献发现其实那蛋白用Zn柱效果好
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终于熬成木虫了……
10楼2010-08-27 18:58:25
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