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zyflf

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白不挂柱怎么办已有9人参与

蛋白不挂柱怎么办

his标签,Ni柱,用的Ni-NTA纯化树脂。蛋白51KD,pI9.21,是一种丙酮酸转移酶。过柱后跑胶发现蛋白没了。

麻烦各位帮忙解决一下

[ Last edited by zyflf on 2010-8-27 at 15:52 ]
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zhangjingfei01

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
问题详细点,比如蛋白特性?柱子类型?
2楼2010-08-27 11:13:57
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henkally

禁虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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3楼2010-08-27 11:19:02
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jasco

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
9494,什么柱子,怎么表达的蛋白,有什么标签,一概不知啊
4楼2010-08-27 11:29:16
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sqhnsd

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-08-27 11:29:16:
9494,什么柱子,怎么表达的蛋白,有什么标签,一概不知啊

柱子,标签,蛋白溶解buffer
5楼2010-08-27 11:58:20
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有无标签,挂什么柱子。蛋白大小、pI和所用buffer
6楼2010-08-27 13:25:42
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽

7楼2010-08-27 14:23:24
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zyflf

木虫 (正式写手)

his标签,Ni柱,用的Ni-NTA纯化树脂。蛋白45KD,是一种丙酮酸转移酶。过柱后跑胶发现蛋白没了。

麻烦各位帮忙
8楼2010-08-27 15:42:58
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
binding buffer 的成分,pH?
9楼2010-08-27 16:00:16
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢分享 2010-08-27 20:47:14
Ni离子是已经螯合在柱子上还是每次得自己螯合?
如果需要自己螯合,建议每次新鲜配制上柱
查查文献有没有纯化过类似蛋白。
我上次纯化一个蛋白不挂柱最后查文献发现其实那蛋白用Zn柱效果好
终于熬成木虫了……
10楼2010-08-27 18:58:25
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