版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (2396)
>虫友互识 (483)
>导师招生 (321)
>找工作 (186)
>硕博家园 (97)
>招聘信息布告栏 (73)
>考博 (52)
>留学DIY (50)
>休闲灌水 (35)
>学术会议 (34)
>基金申请 (31)
>公派出国 (16)
>人文社科 (10)
>论文投稿 (7)
>教师之家 (6)
>考研 (6)

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小WAY

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 113
红花: 1
帖子: 44
在线: 35.5小时
虫号: 2118684
注册: 2012-11-10
性别: MM
专业: 临床微生物学检验

[求助] 6KD的蛋白跑western求大神帮助

自己表达的蛋白，flag标签的，4微克每微升上样是40微升（1:4的上样缓冲液），胶是18%,跑胶80V,2H,湿转100mA,2.5H.flag一抗浓度1:500（进口分装抗体）,4度过夜，二抗1:1000室温2H，一点光都没有，求做过小分子量蛋白的大神指点

» 猜你喜欢

售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有3人回复
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急已经有4人回复
27博士申请已经有3人回复
厉娜已经有5人回复
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急已经有12人回复
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有15人回复
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急已经有14人回复
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急已经有16人回复
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急已经有15人回复
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急已经有10人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

western blot 的蛋白上样量已经有8人回复
western目的蛋白发生漂移已经有7人回复
小分子蛋白的western blotting注意事项已经有12人回复
蛋白质消解——一直消解不出来求大神解救~~ 已经有5人回复
western实验中大分子量的蛋白如何鉴定已经有5人回复
我的蛋白跑胶图没什么条带求助大神帮忙已经有9人回复
求助EGFP蛋白的western及免疫荧光问题！！！！！急急急！！！！！已经有4人回复
10kd 和100kd的蛋白同时做western blot 已经有11人回复
求助各位大神关于含组氨酸标签蛋白纯化的问题已经有8人回复
14kd的蛋白，做westernblot，电转条件是怎样的已经有11人回复
请问有人做过分泌蛋白的Western/Elisa检测么？已经有6人回复
做western 如何提蛋白可同时获得膜蛋白和胞内蛋白已经有11人回复
有没有人用Western blot在做17kDa蛋白质,求经验！！！已经有22人回复
有机问高分子的问题！~！蛋白连接，金币可追加，求大神已经有13人回复
western-blot实验结果，大家帮忙分析下已经有7人回复
western blot中蛋白质转印问题已经有17人回复
western 结果220KD 蛋白还好， actin竟然让我凌乱了已经有11人回复
Western Blot实验的蛋白条带都连在一起已经有37人回复
请教western blot 时蛋白稀释液情况已经有4人回复
纯化后的蛋白做western，出现很明显的两条带，请问是二聚体吗？怎么打开成单体？已经有11人回复
求助高人：western 蛋白结果和PCR 的mRNA结果不一致，正常吗？怎么解释？已经有3人回复
Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助已经有22人回复
【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？已经有9人回复
【求助/交流】极小分子与极大分子蛋白的Western Bloting转膜求助！已经有10人回复
Western Blot 磷酸化蛋白测定问题已经有9人回复
western蛋白样品为什么要煮沸再冰浴已经有9人回复

1楼 2013-07-24 18:21:55

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

BioEPI: 4
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-07-25 03:41:09

表达的蛋白上这么蛋白可以考虑染一下胶看看条带。蛋白比较小，膜的孔径大了容易转过。

3楼2013-07-25 00:00:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 6 个回答

nanamaka

新虫 (初入文坛)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 15
帖子: 30
在线: 6.1小时
虫号: 2563621
注册: 2013-07-24
性别: GG
专业: 发育生物学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-24 23:23:10

这个蛋白这么小，你用的什么膜？要注意膜的孔径，如果孔径很容易转出去，其他地方应该没有问题

人生若只如初见

2楼2013-07-24 22:56:41

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

小WAY

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 113
红花: 1
帖子: 44
在线: 35.5小时
虫号: 2118684
注册: 2012-11-10
性别: MM
专业: 临床微生物学检验

★
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2013-07-25 13:29:12

引用回帖:

2楼: Originally posted by nanamaka at 2013-07-24 22:56:41
这个蛋白这么小，你用的什么膜？要注意膜的孔径，如果孔径很容易转出去，其他地方应该没有问题

用的是0.44的，新买的0.22的还没用，蛋白的都快浪费完了

4楼2013-07-25 11:29:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

nanamaka

新虫 (初入文坛)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 15
帖子: 30
在线: 6.1小时
虫号: 2563621
注册: 2013-07-24
性别: GG
专业: 发育生物学

【答案】应助回帖

★
小WAY: 金币+1, ★有帮助 2013-07-28 12:00:46

引用回帖:

4楼: Originally posted by 小WAY at 2013-07-25 11:29:52
用的是0.44的，新买的0.22的还没用，蛋白的都快浪费完了...

0.44肯定不行啊，小蛋白都能转过去，我们做western从来不用0.44um,试一下0.22um吧

人生若只如初见

5楼2013-07-25 16:20:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 6 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

	[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3	zSbvVX9JFl9J 2026-11-09	3/150	2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
	[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3	zSbvVX9JFl9J 2026-11-09	4/200	2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
	[考博] 27博士申请 +3	白白白ly 2026-11-09	3/150	2026-11-09 21:39 by szq0819
	[文学芳草园] 厉娜 +3	张丹枫1991 2026-11-09	5/250	2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
	[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5	kvewwGtKktqB 2026-11-04	12/600	2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
	[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	15/750	2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
	[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6	5sJFDKp2kwuI 2026-11-06	14/700	2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
	[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5	5sJFDKp2kwuI 2026-11-06	16/800	2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
	[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3	5sJFDKp2kwuI 2026-11-06	12/600	2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
	[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4	5sJFDKp2kwuI 2026-11-06	8/400	2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
	[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4	5sJFDKp2kwuI 2026-11-06	8/400	2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
	[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5	5sJFDKp2kwuI 2026-11-06	9/450	2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
	[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3	yexuqing 2026-11-04	5/250	2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
	[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	10/500	2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
	[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	11/550	2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
	[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5	kvewwGtKktqB 2026-11-04	14/700	2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
	[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	7/350	2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
	[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	10/500	2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
	[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3	ttH3f1oA6ace 2026-11-04	9/450	2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
	[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4	hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04	12/600	2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0