24小时热门版块排行榜    

查看: 1953  |  回复: 7

l19z88y22

新虫 (初入文坛)

[求助] western目的蛋白发生漂移

麻烦各位western界的朋友们帮个忙:小弟跑目的蛋白时发生漂移,表现为目的蛋白本来是36KD,而通过标准蛋白分析,该蛋白大概为28KD(然而,我同一批跑的其它蛋白包括Actin却没有这种问题),但我将自己可能出错的地方都纠正了,跑了4次还是一样,崩溃,请大家支支招啦,谢谢!(一抗是SANTA CRUZ的刚刚买来不久,应该没什么问题)
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
l19z88y22(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-07 01:50:04
SDS-PAGE上蛋白的表观分子量与理论值有差别是正常现象,和蛋白本身的性质有关,不用太在意的。
2楼2013-06-07 00:33:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个36KD跑成28KD很正常啊 有时还会变大 那是蛋白糖基化等造成的
3楼2013-06-07 11:00:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l19z88y22

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-07 11:00:56
你这个36KD跑成28KD很正常啊 有时还会变大 那是蛋白糖基化等造成的

你好,我的是蛋白分子量变小了,本来是36KD的,现在是约28KD,我有个博士师兄建议我实在不行将现在的SANTA CRUZ抗体换下,不知SANTA CRUZ抗体是否有时会出现这样不好的现象?
4楼2013-06-07 16:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-12 22:04:12
引用回帖:
4楼: Originally posted by l19z88y22 at 2013-06-07 16:56:53
你好,我的是蛋白分子量变小了,本来是36KD的,现在是约28KD,我有个博士师兄建议我实在不行将现在的SANTA CRUZ抗体换下,不知SANTA CRUZ抗体是否有时会出现这样不好的现象?...

这个抗体只是与目的蛋白的抗原结合,信号放大指示有没有目的蛋白和目的蛋白的大小,只是个指示作用,蛋白条带大小是跟你的目的蛋白有关,有时候目的蛋白空间结构发生变化或者是糖基化等因素使其在聚丙烯酰胺凝胶里跑快一点或者跑慢一点很正常,我觉得你这个变小了也正常嘛,没事的
5楼2013-06-07 17:19:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l19z88y22

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by songzuowei at 2013-06-07 17:19:03
这个抗体只是与目的蛋白的抗原结合,信号放大指示有没有目的蛋白和目的蛋白的大小,只是个指示作用,蛋白条带大小是跟你的目的蛋白有关,有时候目的蛋白空间结构发生变化或者是糖基化等因素使其在聚丙烯酰胺凝胶里 ...

谢谢,不过我不是完全同意您的看法,抗体也有可能与其它具有类似抗原的蛋白接合,这也是为什么杂带产生的原因。
6楼2013-06-08 09:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzuowei

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by l19z88y22 at 2013-06-08 09:58:25
谢谢,不过我不是完全同意您的看法,抗体也有可能与其它具有类似抗原的蛋白接合,这也是为什么杂带产生的原因。...

杂带的产生是由于你的抗体质量本身不好 特异性不强或者封闭没有封闭好 杂带是经常出现,但理论上是不应该出现的
7楼2013-06-08 13:19:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木笑子

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会蛋白降解了呢。
8楼2013-06-09 09:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 l19z88y22 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 86/4300 2026-08-18 00:18 by longsantaizi
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见