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[求助]
求助关于PCR相关问题！
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各位前辈： 大家好，请教个有关PCR相关问题！ 本人是学药化专业的，对生物了解的不太多！但是现在的工作是QC部门的，有一部分工作是做公司产品检测。 最近做公司产品出产前要通过PCR检测其有无HIV,HCV，用的是深圳凯杰生物制品有限公司的试剂盒，产品是激素类生化产品，操作都是按照试剂盒说明书对样品前处理的，结果是到最后几个样品出现“抬头”迹象，而且空白对照也有“抬头迹象”，不知是哪里污染了。之前别人做的都是正常的，按说就算我的样品处理过程中污染了，那么空白就是加酶和反应液和水直接反应应该不会有污染的呀！试验中用到的枪和枪头什么的都是专用的， 这几天在排查原因也没头绪，好郁闷，忘各位前辈们大侠们提点好的建议，比较着急或是有什么好的推荐的资料何以推荐一下的，拜谢各位了！ |
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5楼2013-07-31 19:31:37
2楼2013-07-17 21:01:23
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这位大侠，先感谢你给我回复！会给你送金币的！ 我做的就是荧光定量PCR，之前和我交接的一个同事从四月份开始做就有这种抬头，之前一直都是正常的为阴性，我现在做的HCV,HIV在35 个循环之前都还是好的，但是到了35个循环后就开始有点抬头了，一般HIV设置40个循环最后五个循环会抬头，HCV设置45个循环最后十个循环会有抬头迹象 那你说的所谓抬头“抬头”的样品的溶解曲线的峰的位置和阳性对照（如果你做了的话）是不是相同，是指的是试剂盒中的阳性对照吗？峰的位置具体是指什么位置呢？本人愚钝不太明白，还望不吝赐教！每次都会做阳性对照标准曲线的！引物是试剂盒自带的，一般都在有效期内使用的！ 谢谢，麻烦了！ |
3楼2013-07-17 23:55:32
4楼2013-07-31 16:23:42