| 查看: 1676 | 回复: 9 | |||
lhm_hnyj金虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】PCR效果问题 已有6人参与
|
|
小虫最近用昆虫COII的通用引物对一批一个样本进行了扩增（基因组之前用cytb、COI通用引物分别进行了扩增，效果不错），25ul体系：10*buffer2.5ul，2.5mMdNTP2ul，10UM引物各0.5ul，taq酶1U，模板与之前扩cytb等一致，0.5ul； 退火温度分别采用了46-52度梯度，另外还采用了文献方法，先46度退火6个循环，再52度30循环（不知道是什么原理），结果电泳效果大家都一致，均为较弱的涂抹带。大家能帮忙分析分析可能是哪方面的问题吗？有没有可能得到改进呢  图片右起依次为DL2000marker，空白，46、48、50、52退火及两步退火产物 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有285人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- overlap PCR之问题
已经有16人回复
- PCR产物凝胶回收、酶切等问题请教
已经有7人回复
- 求助！关于RT-PCR的问题！
已经有20人回复
- 求助 土壤基因组 PCR 扩增问题
已经有30人回复
- 请教real time pcr问题，谢谢！
已经有10人回复
- 16SrDNA PCR聚合酶 选择问题
已经有5人回复
- 看看我的DNA提取及PCR结果有什么问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】求助，关于荧光定量PCR问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于PCR的问题
已经有18人回复
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- MolEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
2楼2010-12-10 12:59:38
3楼2010-12-10 14:43:53
yixuanwin
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 22 (小学生)
- 贵宾: 0.001
- 金币: 5937.7
- 红花: 1
- 帖子: 431
- 在线: 40.2小时
- 虫号: 719137
- 注册: 2009-03-10
- 性别: GG
- 专业: 基因组学
4楼2010-12-10 18:17:36
lhm_hnyj
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 156.3
- 散金: 29
- 帖子: 292
- 在线: 166.6小时
- 虫号: 801682
- 注册: 2009-07-01
- 性别: MM
- 专业: 中药检定
5楼2010-12-10 21:27:52
lhm_hnyj
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 156.3
- 散金: 29
- 帖子: 292
- 在线: 166.6小时
- 虫号: 801682
- 注册: 2009-07-01
- 性别: MM
- 专业: 中药检定
6楼2010-12-10 21:29:28
yujiaping1
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1365.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 1174
- 在线: 66.6小时
- 虫号: 929883
- 注册: 2009-12-17
- 性别: MM
- 专业: 疫苗学
7楼2010-12-10 21:41:20
lhm_hnyj
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 156.3
- 散金: 29
- 帖子: 292
- 在线: 166.6小时
- 虫号: 801682
- 注册: 2009-07-01
- 性别: MM
- 专业: 中药检定
8楼2010-12-10 21:52:33
tryingtimes
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 257.2
- 散金: 105
- 红花: 3
- 帖子: 315
- 在线: 60.2小时
- 虫号: 1031597
- 注册: 2010-05-30
- 专业: 药物学其他科学问题
9楼2010-12-10 23:13:45
lhm_hnyj
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 156.3
- 散金: 29
- 帖子: 292
- 在线: 166.6小时
- 虫号: 801682
- 注册: 2009-07-01
- 性别: MM
- 专业: 中药检定
我又提高温度跑了梯度，还是涂抹带，同时用了另一对引物，那对引物出了亮带
10楼2010-12-13 20:05:25
40