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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 16SrDNA PCR聚合酶 选择问题
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bear0329

金虫 (正式写手)

[求助] 16SrDNA PCR聚合酶 选择问题

我做16SrDNA扩增，买酶的时候是买TAKALA的，我买的是TAKALA EX酶，但是不知道到就用TAKALA普通酶效果怎么样，TAKALA普通酶比TAKALA EX酶便宜，不知道我的实验用TAKALA普通酶可以吗？谢谢各位虫友提出宝贵意见！
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以马内利！
1楼2011-06-28 17:05:36
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caihy119

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

bear0329(金币+2): 谢谢啊 2011-06-29 10:51:29
引用回帖:
Originally posted by bear0329 at 2011-06-28 17:05:36:
我做16SrDNA扩增，买酶的时候是买TAKALA的，我买的是TAKALA EX酶，但是不知道到就用TAKALA普通酶效果怎么样，TAKALA普通酶比TAKALA EX酶便宜，不知道我的实验用TAKALA普通酶可以吗？谢谢各位虫友提出宝贵意见！

作环境的最好选择EX,甚至更好的LA, 建议不要用普通的rTaq, 因为它扩增效率很高， 容易引入错配，如果环境中某一类群很丰富的话， 它会成百倍的放大， 而忽视了小类群的微生物
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2楼2011-06-28 17:44:28
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xiadongliang

金虫 (正式写手)
一直在用rtaq，没有用那么贵的EXtaq。
做环境微生物，没有必要用EXtaq这么好的酶。细菌相似性在97%以上可确定为同一种，本身细菌就存在突变，PCR扩增导致的碱基变异频率不会大于3%吧。
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3楼2011-06-29 13:11:55
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiadongliang at 2011-06-29 13:11:55:
一直在用rtaq，没有用那么贵的EXtaq。
做环境微生物，没有必要用EXtaq这么好的酶。细菌相似性在97%以上可确定为同一种，本身细菌就存在突变，PCR扩增导致的碱基变异频率不会大于3%吧。

谢谢啊，下次也买一点那个酶试试看，呵呵
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以马内利！
4楼2011-06-29 15:29:53
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xiem188

铜虫 (小有名气)
看你在哪里做实验，用老板的钱的话绝对用好的，效果好，又不会出错
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5楼2011-06-29 17:10:22
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiem188 at 2011-06-29 17:10:22:
看你在哪里做实验，用老板的钱的话绝对用好的，效果好，又不会出错

嘿嘿，好主意
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以马内利！
6楼2011-06-29 17:42:14
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