| 查看: 2502 | 回复: 27 | |||
[交流]
转化之前如何验证连接是否成功 已有11人参与
|
|||
| 将双酶切的目的片段与双酶切的载体进行连接，在转化之前，怎么判断有没有连起来？跑胶验证可以吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有97人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 急求:PCR 产物连接转化 涂板后就是不长 到底是怎么回事啊
已经有5人回复
- 连接转化交流贴
已经有14人回复
- 酶切、连接和转化
已经有9人回复
- 连接转化不长菌是怎么回事？？？
已经有15人回复
- 重组质粒转化之前需要酶切验证吗
已经有5人回复
- 单酶切连接转化，感受态的问题？！
已经有11人回复
- 双酶切，连接，转化问题
已经有30人回复
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 酶切酶连转化
已经有11人回复
- 连接转化不成功问题
已经有17人回复
- 连接转化进大肠杆菌BL21
已经有6人回复
- 用clontech的SMART建cDNA文库，连接转化不成功，求助！！急死了！！！
已经有3人回复
- 转化连接遇到的奇怪的事！
已经有3人回复
- 连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增
已经有5人回复
- 【求助/交流】连接转化
已经有9人回复
- 【求助/交流】酶连转化
已经有24人回复
- 【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】大片段连接转化成功与否问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】长片段的连接转化
已经有9人回复
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-07-12 21:52:51
1949stone: 回帖置顶 2013-07-17 11:08:36
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-07-12 21:52:51
1949stone: 回帖置顶 2013-07-17 11:08:36
|
不是啦，空载体理论上是不会长斑的，因为被切开的载体是不能表达的，所以在抗性板上长不了。但是如果酶切不完全，或者载体有自连，那就也能长斑。 楼主想知道连接、转化的效果好不好，那就应该做个空白对照。也就是在你连接的时候，同时做一管只加载体不加外源片段的连接，转化的时候也拿这管空载体的连接产物去做转化。正常情况下空白对照的板长出来的菌应该很少，起码要明显比实验组少。如果空白对照的板都长了一堆，那最好不要往下筛了，重新酶切载体、连接、转化。硬要往下做的话，做好心理准备，因为大部分菌斑是阴性的。 如果想减少自连，可以在酶切了载体之后，对载体去磷。 |
8楼2013-07-12 21:37:33
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
2楼2013-07-12 20:59:56
3楼2013-07-12 21:10:46
4楼2013-07-12 21:14:40
5楼2013-07-12 21:19:58
6楼2013-07-12 21:23:23
7楼2013-07-12 21:31:51
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
9楼2013-07-12 22:09:14
yb19841014
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 45 (小学生)
- 金币: 21099
- 散金: 5
- 红花: 2
- 帖子: 2549
- 在线: 155.6小时
- 虫号: 2256089
- 注册: 2013-01-23
- 专业: 河口海岸学
10楼2013-07-13 20:03:06
