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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化之前如何验证连接是否成功
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易翔仪冲

新虫 (初入文坛)

[交流] 转化之前如何验证连接是否成功 已有11人参与

将双酶切的目的片段与双酶切的载体进行连接，在转化之前，怎么判断有没有连起来？跑胶验证可以吗？
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1楼 2013-07-12 14:39:14
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-15 20:17:46
可以使用质谱对于认为连接好的质粒检测相对分子量，参考对对未连接的质粒和需要连接的DNA片段的相对分子量。
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9楼2013-07-12 22:09:14
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没听说过有这种方法，看看有没有高人指点下。不过连接上的产物一般量很少，跑胶是看不出来的。
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2楼2013-07-12 20:59:56
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547star

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
想到一个办法，因为平时连接转化都没问题，就没做实验。没经过验证，就不说了。
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为什么
3楼2013-07-12 21:10:46
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
反正一个引物在backbone上 一个在insert上，PCR能P出来，不过我基本都是做colony pcr时候找不到阳性对照才这么P的，我也没怎么连接转化失败过。
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4楼2013-07-12 21:14:40
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