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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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易翔仪冲

新虫 (初入文坛)

[交流] 转化之前如何验证连接是否成功 已有11人参与

将双酶切的目的片段与双酶切的载体进行连接,在转化之前,怎么判断有没有连起来?跑胶验证可以吗?
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-15 20:17:46
可以使用质谱对于认为连接好的质粒检测相对分子量,参考对对未连接的质粒和需要连接的DNA片段的相对分子量。
9楼2013-07-12 22:09:14
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没听说过有这种方法,看看有没有高人指点下。不过连接上的产物一般量很少,跑胶是看不出来的。
2楼2013-07-12 20:59:56
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547star

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
想到一个办法,因为平时连接转化都没问题,就没做实验。没经过验证,就不说了。
为什么
3楼2013-07-12 21:10:46
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
反正一个引物在backbone上 一个在insert上,PCR能P出来,不过我基本都是做colony pcr时候找不到阳性对照才这么P的,我也没怎么连接转化失败过。
4楼2013-07-12 21:14:40
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