24小时热门版块排行榜

返回列表

friya0910

新虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 19.4
帖子: 401
在线: 77.4小时
虫号: 1073675

[交流] 转化连接遇到的奇怪的事！

昨天做了转化涂板，今天的结果让我很无语啊
用的载体是pET32a，共做了七个板，具体结果如下
载体加目的片段的连接液，取10微升转化DH5a（感受态新买的，第一次用），取10微升转化TOP 10，结果TOP 10 长得很好，DH5a没长
酶切过的载体做连接，转化DH5a，结果没长
酶切过得载体加目的片段未作连接，转化DH5a长了2个
原载体质粒转化（阳性对照）转化DH5a长了1个

这是个什么状况啊？我感觉是新买的感受态出问题了！那这样我的对照都没有意义了吗？

回复此楼

» 猜你喜欢

邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂已经有0人回复
天津商业大学生物与医药课题组招生已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有213人回复
生物化工学硕招收调剂已经有0人回复
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生已经有0人回复
化工申博已经有3人回复
申博自荐已经有3人回复
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！已经有0人回复
透明质酸酶的作用机制：如何实现药物递送已经有0人回复
爱思维尔旗下LWT投稿已经有4人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

连接转化出现很多微小的菌落已经有14人回复
做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? 已经有24人回复
关于稳定结构的计算，我遇到一个奇怪的现象已经有3人回复
胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题已经有8人回复
做液相遇到一个奇怪的现象，基线会忽然规律波动起来？？？已经有3人回复
【求助/交流】连接转化时遇到的奇怪问题求解已经有12人回复
【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？已经有20人回复
【求助/交流】请教连接转化方面的问题已经有14人回复
【求助/交流】神奇！蓝白斑筛选时遇到的神奇事件！！！已经有11人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-08-16 09:28:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 19.4
帖子: 401
在线: 77.4小时
虫号: 1073675

引用回帖:

1楼: Originally posted by friya0910 at 2011-08-16 09:28:57:
昨天做了转化涂板，今天的结果让我很无语啊
用的载体是pET32a，共做了七个板，具体结果如下
载体加目的片段的连接液，取10微升转化DH5a（感受态新买的，第一次用），取10微升转化TOP 10，结果TOP 10 长得很好， ...

怎么没人回复啊？自己先顶一个啦！
补充点信息，当时做完转化之后摇了1h多点就取200微升涂板了，吸取DH5a时感觉已经浑浊，但吸取TOP 10感觉好像还没浑浊，涂完板后我又将TOP 10放回37度又振荡培养了2h，然后吸100微升涂板，接着又把剩下的离心，去除部分培养基后涂板，结果培养了差不多12h菌就已经长得密密麻麻了！
因为没有对照，也不知道长出来的TOP 10 有没有我要的阳性克隆，今天先挑几个试试吧！