24小时热门版块排行榜    

查看: 705  |  回复: 3

friya0910

新虫 (正式写手)


[交流] 转化连接遇到的奇怪的事!

昨天做了转化涂板,今天的结果让我很无语啊
用的载体是pET32a, 共做了七个板,具体结果如下
载体加目的片段的连接液,取10微升转化DH5a(感受态新买的,第一次用),取10微升转化TOP 10,结果TOP 10 长得很好,DH5a没长
酶切过的载体做连接,转化DH5a,结果没长
酶切过得载体加目的片段未作连接,转化DH5a长了2个
原载体质粒转化(阳性对照)转化DH5a长了1个

这是个什么状况啊?我感觉是新买的感受态出问题了!那这样我的对照都没有意义了吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)


引用回帖:
1楼: Originally posted by friya0910 at 2011-08-16 09:28:57:
昨天做了转化涂板,今天的结果让我很无语啊
用的载体是pET32a, 共做了七个板,具体结果如下
载体加目的片段的连接液,取10微升转化DH5a(感受态新买的,第一次用),取10微升转化TOP 10,结果TOP 10 长得很好, ...

怎么没人回复啊?自己先顶一个啦!
补充点信息,当时做完转化之后摇了1h多点就取200微升涂板了,吸取DH5a时感觉已经浑浊,但吸取TOP 10感觉好像还没浑浊,涂完板后我又将TOP 10放回37度又振荡培养了2h,然后吸100微升涂板,接着又把剩下的离心,去除部分培养基后涂板,结果培养了差不多12h菌就已经长得密密麻麻了!
因为没有对照,也不知道长出来的TOP 10 有没有我要的阳性克隆,今天先挑几个试试吧!
2楼2011-08-16 09:48:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lalafeng

银虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
friya0910(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-08-16 11:38:46
可以先验证转化板上的菌是否是真转化子,如果验证是的,则DH5a很可能有问题了,我们实验室都是自己做感受态的,感觉也不错
3楼2011-08-16 10:05:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by lalafeng at 2011-08-16 10:05:03:
可以先验证转化板上的菌是否是真转化子,如果验证是的,则DH5a很可能有问题了,我们实验室都是自己做感受态的,感觉也不错

我用的是天根的感受态,之前都挺好的,不知道这次是怎么了!
下午挑菌,明天先验证几个看看,但愿有好运吧!幸好带做了一管TOP 10 不然出了什么问题都不知道,长了个教训,以后受到感受态还是先验证一下比较好啊!
4楼2011-08-16 10:08:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 friya0910 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:38 by 无际的草原
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分,求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕,一志愿中国矿业大学,总分314,求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 293求调剂 +3 世界首富 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:27 by JourneyLucky
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123! 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +4 薛云鹏 2026-03-13 4/200 2026-03-13 10:40 by 学员8dgXkO
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
信息提示
请填处理意见