24小时热门版块排行榜    

查看: 2686  |  回复: 27

grape_vine

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-07-12 22:09:14
可以使用质谱对于认为连接好的质粒检测相对分子量,参考对对未连接的质粒和需要连接的DNA片段的相对分子量。

无疑冒犯,怎么感觉驴价比马价大阿
11楼2013-07-13 20:12:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-07-13 20:03:06
可以跑胶看的。要看你的插入片段大小了。如果是500bp以上的,是能看到比载体质粒高一些的

有没有亲自做过吗? 这个可能性基本上没有吧
12楼2013-07-13 20:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by grape_vine at 2013-07-13 20:14:10
有没有亲自做过吗? 这个可能性基本上没有吧...

做过的啊 。连接的产物就是比载体要高一点的。我是用T4连的啊
13楼2013-07-13 22:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by grape_vine at 2013-07-13 20:12:54
无疑冒犯,怎么感觉驴价比马价大阿 ...

当然可以做凝胶检测,不过凝胶有时精度达不到。
14楼2013-07-13 23:02:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by yb19841014 at 2013-07-13 22:16:58
做过的啊 。连接的产物就是比载体要高一点的。我是用T4连的啊...

真的啊? 我总感觉这个效率应该达不到凝胶可以检测的水平。我能看看你的图吗?
15楼2013-07-13 23:27:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape_vine

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-07-13 23:02:29
当然可以做凝胶检测,不过凝胶有时精度达不到。...

呵呵 应该是pcr最合适了,其他的我都没试过,而且我连pcr都没做过,都是直接做转化的
16楼2013-07-13 23:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
16楼: Originally posted by grape_vine at 2013-07-13 23:28:46
呵呵 应该是pcr最合适了,其他的我都没试过,而且我连pcr都没做过,都是直接做转化的...

转化完成,用化学法,sanger 法,PCR法测序很方便就能知道有没有连接成功。因为我想很多人都会提供这个答案,我就没有说出此答案。
17楼2013-07-14 00:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

370769676

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
被切开的质粒是不会扩增的!
18楼2013-07-14 16:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
线状DNA不能用PCR扩增?
19楼2013-07-14 18:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

易翔仪冲

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 西瓜 at 2013-07-12 21:37:33
不是啦,空载体理论上是不会长斑的,因为被切开的载体是不能表达的,所以在抗性板上长不了。但是如果酶切不完全,或者载体有自连,那就也能长斑。
楼主想知道连接、转化的效果好不好,那就应该做个空白对照。也就是 ...

好的,谢谢!
20楼2013-07-14 19:47:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 易翔仪冲 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] 帮忙看看fileCode +3 wwncly 2026-08-10 5/250 2026-08-10 19:06 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +11 archvillain 2026-08-04 13/650 2026-08-10 14:41 by seekfind
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见