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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

[求助] 求助RNA甲醛变性琼脂糖电泳上样量相关问题 已有1人参与

大家好!弱弱地问几个很基础的问题,不是说没看过相关资料,很多资料的量都是很大的,不太适合我,而且有些书没有讲明它究竟是怎么个配比法,下面的问题我还是没搞懂,惭愧啊!望有经验的朋友过来看看,指点一下
     1  RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳配制1XMOPS缓冲液时,我看书,有要再加甲醛,这个甲醛的终浓度是多少呢?
     2  配制琼脂糖凝胶时,甲醛的终浓度又是多少呢?我看了一些资料,算了算甲醛的量的比例,感觉都不一样,不知道是怎么算的
     3  样品处理时,甲醛和去离子甲酰胺与样品、10XMOPS的量是怎么确定的呢?有课本说RNA总量不要超过20ug,丰度小的可以上4~5ug我自己的RNA浓度是250ug/ML ,按这么算,也就是0.25ug/ul,假如上4ug,不是得上样17uL?是这样吗?我的样品本来来就不多,才20uL,检测完之后我都不用做反转录了?样品主要是很珍贵~

在线等~~
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思路决定出路。。。
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

来回看了很多遍,还是没能要到自己的答案。。。。。难道说很少人做这个吗?还是不屑回答这样的问题呢?
思路决定出路。。。
4楼2013-07-04 19:55:07
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幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物版块 期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-04 17:26:34
lmcyjxs: 金币+1, 有帮助 2013-07-04 19:55:33
我每次都是用普通的琼脂糖电泳,效果挺好,你可以试一下
2楼2013-07-04 10:06:53
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 幽魂银龙 at 2013-07-04 10:06:53
我每次都是用普通的琼脂糖电泳,效果挺好,你可以试一下

谢谢,呵呵,我要用甲醛变性胶来检测RNA的完整性,普通的琼脂糖不能啊
思路决定出路。。。
3楼2013-07-04 11:59:31
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念独boy

木虫 (著名写手)

同问啊,楼主,那个,甲醛浓度到底多大呀?是配胶的时候再加进去吗?
好好努力...
5楼2014-02-26 22:46:55
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