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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助RNA甲醛变性琼脂糖电泳上样量相关问题
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

[求助] 求助RNA甲醛变性琼脂糖电泳上样量相关问题 已有1人参与

大家好！弱弱地问几个很基础的问题，不是说没看过相关资料，很多资料的量都是很大的，不太适合我，而且有些书没有讲明它究竟是怎么个配比法，下面的问题我还是没搞懂，惭愧啊！望有经验的朋友过来看看，指点一下
     1  RNA甲醛变性琼脂糖凝胶电泳配制1XMOPS缓冲液时，我看书，有要再加甲醛，这个甲醛的终浓度是多少呢？
     2  配制琼脂糖凝胶时，甲醛的终浓度又是多少呢？我看了一些资料，算了算甲醛的量的比例，感觉都不一样，不知道是怎么算的
     3  样品处理时，甲醛和去离子甲酰胺与样品、10XMOPS的量是怎么确定的呢？有课本说RNA总量不要超过20ug，丰度小的可以上4~5ug我自己的RNA浓度是250ug/ML ，按这么算，也就是0.25ug/ul，假如上4ug，不是得上样17uL？是这样吗？我的样品本来来就不多，才20uL，检测完之后我都不用做反转录了？样品主要是很珍贵~

在线等~~
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思路决定出路。。。
1楼 2013-07-04 09:27:24
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 幽魂银龙 at 2013-07-04 10:06:53
我每次都是用普通的琼脂糖电泳，效果挺好，你可以试一下

谢谢，呵呵，我要用甲醛变性胶来检测RNA的完整性，普通的琼脂糖不能啊
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思路决定出路。。。
3楼2013-07-04 11:59:31
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幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物版块 期待你的精彩和更详细的解答。 2013-07-04 17:26:34
lmcyjxs: 金币+1, ★有帮助 2013-07-04 19:55:33
我每次都是用普通的琼脂糖电泳，效果挺好，你可以试一下
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2楼2013-07-04 10:06:53
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)
来回看了很多遍，还是没能要到自己的答案。。。。。难道说很少人做这个吗？还是不屑回答这样的问题呢？
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思路决定出路。。。
4楼2013-07-04 19:55:07
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念独boy

木虫 (著名写手)
同问啊，楼主，那个，甲醛浓度到底多大呀？是配胶的时候再加进去吗？
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好好努力...
5楼2014-02-26 22:46:55
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