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xiaomch2011

新虫 (初入文坛)

[交流] western blot 的蛋白上样量 已有6人参与

我是新手,没做过western,看资料western的蛋白上样量是30-100微克,有这么多吗??蛋白电泳考染也是1-2微克就可以了??western听说会上少一点,这样搞到我糊涂了,究竟上多少微升的蛋白??

[ Last edited by xiaomch2011 on 2013-6-26 at 11:59 ]
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sc5921041

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
if your antibody is not so good or the protein level in the cell is quite low , the loading amount can be up to 500ug.
nostalgia
7楼2013-06-27 09:53:58
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查看全部 9 个回答

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

一般上50ug左右的量
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-06-26 12:27:09
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-26 14:26:11
50 ug?不能一概而论吧
还是要取决于样品,是细胞裂解液还是单一蛋白?单一蛋白的话几个微克就足够,如果是细胞裂解液的话可以上的多一些,10-20 ug
3楼2013-06-26 12:47:37
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xiaomch2011

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-06-26 12:47:37
50 ug?不能一概而论吧
还是要取决于样品,是细胞裂解液还是单一蛋白?单一蛋白的话几个微克就足够,如果是细胞裂解液的话可以上的多一些,10-20 ug

我的蛋白是单一蛋白,浓度0.62mg/ml,我跑电泳考染是上3ul,那么western也上3ul??这样子会不会太多了??
4楼2013-06-26 13:08:01
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