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xiaomch2011新虫 (初入文坛)
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[交流]
western blot 的蛋白上样量 已有6人参与
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我是新手，没做过western，看资料western的蛋白上样量是30-100微克,有这么多吗？？蛋白电泳考染也是1-2微克就可以了？？western听说会上少一点，这样搞到我糊涂了，究竟上多少微升的蛋白？？ [ Last edited by xiaomch2011 on 2013-6-26 at 11:59 ] |
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 蛋白质生物学实验经验 |
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30-100μg蛋白是指未经纯化的总蛋白提取物的量。如果你用的是纯品，western的上样量可以很小。western的检出限比考染和银染都低，一般只要有ng级，甚至几十pg的蛋白就可以检测到。当然，这还要看你使用的抗体的效价如何。我觉得你可以把考染是上样量降低100-1000倍试试。 |
5楼2013-06-26 14:15:28
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