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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T-A克隆问题
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梁小梁

新虫 (初入文坛)

[求助] T-A克隆问题

进行T-A克隆，PCR鉴定时在目的位置有片段，怎么测序的结果都不对？求各位高手指点指点，谢谢啦。。
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1楼 2013-05-27 11:24:24
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

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梁小梁(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-30 10:11:37
克隆做PCR的时候产物片段的大小和预计的相同么？
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4楼2013-05-27 15:11:41
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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梁小梁(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-30 10:11:13
T-A克隆只要是PCR产物都能连接上去，连接也没有方向性，可以正的连也可以反的连。测序是有方向的，你先反向互补下看是不是你要的东西，如果还不是，挑其他菌落去测序。
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2楼2013-05-27 13:08:19
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sl35537417

木虫 (正式写手)

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梁小梁(myprayer代发): 金币+1, Send person rose fragrance in hand, thank you loosen one\'s purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-05-30 10:11:25
正常   说明引物特异性不好
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3楼2013-05-27 14:34:11
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