24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3205  |  回复: 5

听翠晨

铜虫 (初入文坛)

[求助] 空载体酶切后条带大小不对

我要构重组质粒,但是在第一步空载酶切上就出问题了,我是双酶切,跑胶时条带是一大一小,但是小的那条总略大于理论大小,换了几种酶还是这种效果,如图中间是两条是酶切质粒,两端是MARKER,理论上应该是3800bp,可是却快到5000bp了。我这载体还是原来的载体吗?求高手指点
空载体酶切后条带大小不对
酶切.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

基因克隆

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
听翠晨(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-23 22:19:27
感觉质粒没有切开, 一个酶都没有切到. 楼主先测一下序列吧, 别用成了其他的质粒.
2楼2013-05-23 19:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

听翠晨

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-23 19:25:55
感觉质粒没有切开, 一个酶都没有切到. 楼主先测一下序列吧, 别用成了其他的质粒.

没有切开,怎么会有两条带呢,不懂
3楼2013-07-20 09:26:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
听翠晨(gyesang代发): 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-20 21:46:41
提出来的质粒可能会后supercoil的状态(有点像缩成一团的橡皮筋), 这种状态的质粒和一般舒展的环形质粒跑胶速度不一样.
4楼2013-07-20 18:22:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
听翠晨(gyesang代发): 金币+2, 鼓励交流! 2013-07-20 21:47:03
首先,你有么有跑对照——未酶切的质粒
再次,你可以把那个片段回收一下,再跑或者pcr判断是不是你所需要的片段——当然前提是你又pcr引物
有时候marker并不完全可靠,尤其是经过多次室温洗礼的,呵呵,但是多半还是相当可靠的
修身、齐家、治国、平天下
5楼2013-07-20 18:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 尤其是从别人那里拿过来的质粒,第一件事,就是测序! 2013-07-20 21:47:29
补充一点就是你确实需要测序,我这半年就是跌到在了拿到的质粒都没有测序,哎,太相信人了
修身、齐家、治国、平天下
6楼2013-07-20 18:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 听翠晨 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +14 柯淮然 2026-04-12 16/800 2026-04-12 19:22 by dan_wang
[考研] 药学求调剂 +3 RussHu 2026-04-12 4/200 2026-04-12 17:49 by 陈皮皮
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +26 严西西戏 2026-04-06 33/1650 2026-04-11 23:01 by 314126402
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 352 求调剂 +6 yzion 2026-04-11 8/400 2026-04-11 16:24 by 明月此时有
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 调剂 +4 电气300求调剂不 2026-04-08 7/350 2026-04-11 10:44 by 紫曦紫棋
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +8 求上岸的小王 2026-04-10 8/400 2026-04-10 15:09 by hemengdong
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 265求调剂 +4 风说她早忘了 2026-04-07 4/200 2026-04-09 13:59 by only周
[考研] 求调剂 +15 熊二想上岸 2026-04-06 15/750 2026-04-08 04:53 by 无际的草原
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
信息提示
请填处理意见