24小时热门版块排行榜    

查看: 3328  |  回复: 5

听翠晨

铜虫 (初入文坛)

[求助] 空载体酶切后条带大小不对

我要构重组质粒,但是在第一步空载酶切上就出问题了,我是双酶切,跑胶时条带是一大一小,但是小的那条总略大于理论大小,换了几种酶还是这种效果,如图中间是两条是酶切质粒,两端是MARKER,理论上应该是3800bp,可是却快到5000bp了。我这载体还是原来的载体吗?求高手指点
空载体酶切后条带大小不对
酶切.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

基因克隆

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
听翠晨(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-23 22:19:27
感觉质粒没有切开, 一个酶都没有切到. 楼主先测一下序列吧, 别用成了其他的质粒.
2楼2013-05-23 19:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

听翠晨

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-23 19:25:55
感觉质粒没有切开, 一个酶都没有切到. 楼主先测一下序列吧, 别用成了其他的质粒.

没有切开,怎么会有两条带呢,不懂
3楼2013-07-20 09:26:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
听翠晨(gyesang代发): 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-20 21:46:41
提出来的质粒可能会后supercoil的状态(有点像缩成一团的橡皮筋), 这种状态的质粒和一般舒展的环形质粒跑胶速度不一样.
4楼2013-07-20 18:22:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
听翠晨(gyesang代发): 金币+2, 鼓励交流! 2013-07-20 21:47:03
首先,你有么有跑对照——未酶切的质粒
再次,你可以把那个片段回收一下,再跑或者pcr判断是不是你所需要的片段——当然前提是你又pcr引物
有时候marker并不完全可靠,尤其是经过多次室温洗礼的,呵呵,但是多半还是相当可靠的
修身、齐家、治国、平天下
5楼2013-07-20 18:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 尤其是从别人那里拿过来的质粒,第一件事,就是测序! 2013-07-20 21:47:29
补充一点就是你确实需要测序,我这半年就是跌到在了拿到的质粒都没有测序,哎,太相信人了
修身、齐家、治国、平天下
6楼2013-07-20 18:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 听翠晨 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 6/300 2026-08-31 03:16 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-31 02:56 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-31 01:38 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-31 01:15 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-31 01:07 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +5 雨打竹帘 2026-08-30 9/450 2026-08-30 22:23 by 余韵清
[基金申请] 能否申诉? +4 echo8914667 2026-08-30 5/250 2026-08-30 21:11 by echo8914667
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:29 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:57 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:01 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:28 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:17 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
信息提示
请填处理意见