24小时热门版块排行榜    

查看: 3183  |  回复: 5

听翠晨

铜虫 (初入文坛)

[求助] 空载体酶切后条带大小不对

我要构重组质粒,但是在第一步空载酶切上就出问题了,我是双酶切,跑胶时条带是一大一小,但是小的那条总略大于理论大小,换了几种酶还是这种效果,如图中间是两条是酶切质粒,两端是MARKER,理论上应该是3800bp,可是却快到5000bp了。我这载体还是原来的载体吗?求高手指点
空载体酶切后条带大小不对
酶切.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

基因克隆

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
听翠晨(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-23 22:19:27
感觉质粒没有切开, 一个酶都没有切到. 楼主先测一下序列吧, 别用成了其他的质粒.
2楼2013-05-23 19:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

听翠晨

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2013-05-23 19:25:55
感觉质粒没有切开, 一个酶都没有切到. 楼主先测一下序列吧, 别用成了其他的质粒.

没有切开,怎么会有两条带呢,不懂
3楼2013-07-20 09:26:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
听翠晨(gyesang代发): 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-20 21:46:41
提出来的质粒可能会后supercoil的状态(有点像缩成一团的橡皮筋), 这种状态的质粒和一般舒展的环形质粒跑胶速度不一样.
4楼2013-07-20 18:22:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
听翠晨(gyesang代发): 金币+2, 鼓励交流! 2013-07-20 21:47:03
首先,你有么有跑对照——未酶切的质粒
再次,你可以把那个片段回收一下,再跑或者pcr判断是不是你所需要的片段——当然前提是你又pcr引物
有时候marker并不完全可靠,尤其是经过多次室温洗礼的,呵呵,但是多半还是相当可靠的
修身、齐家、治国、平天下
5楼2013-07-20 18:39:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 尤其是从别人那里拿过来的质粒,第一件事,就是测序! 2013-07-20 21:47:29
补充一点就是你确实需要测序,我这半年就是跌到在了拿到的质粒都没有测序,哎,太相信人了
修身、齐家、治国、平天下
6楼2013-07-20 18:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 听翠晨 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +6 谷雨上岸 2026-03-23 7/350 2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +4 SYA! 2026-03-23 4/200 2026-03-26 15:27 by caiaijun80
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 318求调剂 +5 plum李子 2026-03-21 8/400 2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见