24小时热门版块排行榜    

查看: 3533  |  回复: 2

kefengni

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒转化是假阳性!!求助

最近做个质粒转化,转了几次,平板上菌是长了,但是挑菌做PCR就P不出。抽出的质粒和原始菌液都做过PCR,条带是正确的。我还拿质粒去测序,也是正确的。但就是做质粒转化后就P不出了。我转的是DH5α,载体是PET21a。让别人给我做过,结果也是一样。感受态是商用的,应该不会有染菌的现象。
不知道什么原因,求助啊!!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那你为什么不认为你是PCR的愿意一定说是质粒“假阳性”(没有听过的名字)。菌落PCR中是否所有对照都加了,确保这个PCR体系与程序没有问题。我想还是你菌落PCR的问题,好好加入对照吧,菌是否挑到,起始变性时间一般为5min 对细胞作为模板。
2楼2013-05-23 10:29:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lieblingli

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-23 10:29:00
那你为什么不认为你是PCR的愿意一定说是质粒“假阳性”(没有听过的名字)。菌落PCR中是否所有对照都加了,确保这个PCR体系与程序没有问题。我想还是你菌落PCR的问题,好好加入对照吧,菌是否挑到,起始变性时间一般 ...

对照都有p过,只加了引物未加模版的没有P出。加了原始菌液的可以P出。
3楼2013-05-23 10:48:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kefengni 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292,求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 0856材料求调剂 +11 hyf hyf hyf 2026-02-28 12/600 2026-03-01 18:57 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
信息提示
请填处理意见