应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蓝斑和白斑都有带，为什么呢 急。
101/1返回列表
查看: 1511  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

索索00

铁虫 (小有名气)

[求助] 蓝斑和白斑都有带，为什么呢 急。

我现在的疑问是：我对我的对照组进行了质粒提取检测，发现篮板和白色菌落都有带还很亮，有图片，第一个是原来的质粒，后面四个是长得菌落，前面两个是蓝斑，后面是百菌落，按理说，用一个环状的质粒做转化的话，他不应该有带的，可是现在，，，，，什么原因，还请各位帮忙分析下，谢谢啦！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-19 07:46:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有2个 )

索索00

铁虫 (小有名气)
索索00: 回帖置顶 2011-12-21 14:32:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2011-12-19 09:20:35:
用环状的质粒做转化不应该有带？ 不是很明白什么意思。
楼主可以把整个实验说清楚一些，还有质粒是什么质粒，菌落PCR是怎么P的之类...

恩 好的：      我现在又重新做了，用为我的连接产物提了质粒，条带是有的，说明我的外源DNA转进去了，可是，为什么就是只长几个呢？这一次的从头到尾都是师兄一个人操作，他的长了有100百多，我的就只有几个，要疯掉了。不知道是哪出错了，步骤方法是没有问题的，别人都做出来了，我就不行。。。。哎。
赞一下 回复此楼
7楼2011-12-21 14:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

索索00

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by yuxia82012 at 2011-12-21 15:25:18:
你是在做克隆吗？如果是克隆的话就不要纠结别人长得多你的长得少，只要有一个对了就好，连接鉴定的话建议不要用PCR，一个快检，一个酶切鉴定就足够了

恩 我是在做克隆，可是我要建库，几个是绝对不行的，必须要最少要500多才行，那是最少的。
赞一下 回复此楼
10楼2011-12-22 08:36:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

longrna

新虫 (正式写手)
用环状的质粒做转化不应该有带？ 不是很明白什么意思。
楼主可以把整个实验说清楚一些，还有质粒是什么质粒，菌落PCR是怎么P的之类...
赞一下 回复此楼
伟大航线....
2楼2011-12-19 09:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): Good! 2011-12-22 18:27:18
PCR假阳性，所以单做PCR是不行的，还要酶切验证！
原因：1 可能是质粒并没有完全转化到细菌中去，而是吸附在表面。2 可能是细菌基因组内有引物结合位点
赞一下(1人) 回复此楼
真相是最大的奢侈品
3楼2011-12-19 09:35:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-12-22 18:27:38
这是质粒图还是PCR结果？要是质粒图，你的蓝白斑都阴性，要是PCR鉴定的结果，还是对质粒双酶切看看吧，PCR鉴定的假阳性都很多，PCR结果不可信，可能是PCR污染导致的！
赞一下(1人) 回复此楼
大家共同交流、共同提高！！！
4楼2011-12-19 18:35:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+2): Good！ 2011-12-22 18:28:03
你用的是特异引物吧，转化时质粒用量较高，质粒涂在平板上，PCR可以扩增30亿倍，也就是说你挑点培养基也可以P出带来。有两种办法：1，用载体通用引物P；2，用2ml管摇菌后再PCR。
赞一下(1人) 回复此楼
生命不息，探索不止。
5楼2011-12-19 20:03:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我很奇怪为什么环状的质粒转化不应该有结果？而且是说提质粒没结果还是PCR没结果？
赞一下 回复此楼
6楼2011-12-19 23:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

索索00

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by piaoyunokok at 2011-12-19 23:40:41:
我很奇怪为什么环状的质粒转化不应该有结果？而且是说提质粒没结果还是PCR没结果？

PCR是有的，质粒也有呢。都有带，给你看下图片
赞一下 回复此楼
8楼2011-12-21 14:33:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是在做克隆吗？如果是克隆的话就不要纠结别人长得多你的长得少，只要有一个对了就好，连接鉴定的话建议不要用PCR，一个快检，一个酶切鉴定就足够了
赞一下 回复此楼
在等待中涅槃重生
9楼2011-12-21 15:25:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 索索00 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +6 大米饭！ 2026-03-15 6/300 2026-03-16 07:58 by wang_dand
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[文学芳草园] 伙伴们，祝我生日快乐吧 +15 myrtle 2026-03-10 24/1200 2026-03-15 21:16 by 苏州_逗号
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 泣血叩求调剂恩，愿以丹心报师恩 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭