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蓝斑和白斑都有带,为什么呢 急。
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索索00
铁虫
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专业: 生物化学
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蓝斑和白斑都有带,为什么呢 急。
我现在的疑问是:我对我的对照组进行了质粒提取检测,发现篮板和白色菌落都有带还很亮,有图片,第一个是原来的质粒,后面四个是长得菌落,前面两个是蓝斑,后面是百菌落,按理说,用一个环状的质粒做转化的话,他不应该有带的,可是现在,,,,,什么原因,还请各位帮忙分析下,谢谢啦!
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1楼
2011-12-19 07:46:48
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索索00
铁虫
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专业: 生物化学
索索00: 回帖置顶 2011-12-21 14:32:52
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
longrna
at 2011-12-19 09:20:35:
用环状的质粒做转化不应该有带? 不是很明白什么意思。
楼主可以把整个实验说清楚一些,还有质粒是什么质粒,菌落PCR是怎么P的之类...
恩 好的: 我现在又重新做了,用为我的连接产物提了质粒,条带是有的,说明我的外源DNA转进去了,可是,为什么就是只长几个呢?这一次的从头到尾都是师兄一个人操作,他的长了有100百多,我的就只有几个,要疯掉了。不知道是哪出错了,步骤方法是没有问题的,别人都做出来了,我就不行。。。。哎。
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7楼
2011-12-21 14:32:42
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longrna
新虫
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专业: 生物化学
用环状的质粒做转化不应该有带? 不是很明白什么意思。
楼主可以把整个实验说清楚一些,还有质粒是什么质粒,菌落PCR是怎么P的之类...
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伟大航线....
2楼
2011-12-19 09:20:35
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wanhscn
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【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2): Good! 2011-12-22 18:27:18
PCR假阳性,所以单做PCR是不行的,还要酶切验证!
原因:1 可能是质粒并没有完全转化到细菌中去,而是吸附在表面。2 可能是细菌基因组内有引物结合位点
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真相是最大的奢侈品
3楼
2011-12-19 09:35:38
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gene001
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专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-12-22 18:27:38
这是质粒图还是PCR结果?要是质粒图,你的蓝白斑都阴性,要是PCR鉴定的结果,还是对质粒双酶切看看吧,PCR鉴定的假阳性都很多,PCR结果不可信,可能是PCR污染导致的!
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大家共同交流、共同提高!!!
4楼
2011-12-19 18:35:02
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