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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] 目的片段和T载体连接后PCR条带诡异

我的目的片段大概有1200左右,连接到T载体后做蓝白斑筛选,挑取多个白斑提取质粒以后做PCR,结果P出来3条条带,分别是500,1500,3000,有人知道这是什么情况吗?求解答
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chenyawei

金虫 (小有名气)

你的目的基因上肯定设计了酶切位点的,直接把质粒酶切了,跑胶看看不就好了
9楼2013-05-20 17:16:56
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
夏天的普洱茶(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-20 16:28:54
实验需要加入阴性对照与阳性对照,多条条带是PCR引物特异性不强造成的。
2楼2013-05-20 11:12:34
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xjtu0025

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
描述太不清楚了....请做好阴阳性对照...
3楼2013-05-20 11:27:49
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stevenshi021 at 2013-05-20 11:12:34
实验需要加入阴性对照与阳性对照,多条条带是PCR引物特异性不强造成的。

谢谢,我们一般都不加阳性对照,应该是P不出条带才加阳性对照吧
4楼2013-05-20 13:20:52
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