应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核生物 RNA提取
181/2返回列表12下一页
查看: 3924  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

gsq0315

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核生物 RNA提取

第一次刚提取的革兰氏阴性共生菌RNA,不知结果怎样，求高手指点。
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : RNA20130513.tif
    • 2013-05-13 22:31:38, 1.97 M

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

我的实验

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

查找文献

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-13 22:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gsq0315(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-14 11:00:41
质量不好。23S和16S条带太暗，5S太亮，说明降解严重。
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-14 07:49:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsq0315

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-14 07:49:57
质量不好。23S和16S条带太暗，5S太亮，说明降解严重。

在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-14 13:26:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-19 16:52:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-14 13:26:28
在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊...

你指用异丙醇或者乙醇沉淀时看不到？有可能是样品量比较少，你定量RNA了吗？还有就是纯净的核酸是透明的，往往看不太到。一般的样品里有一些盐和其它杂质，所以会出现白色沉淀。晾干样品后就会发现白色的沉淀变得透明了。
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-15 07:53:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsq0315

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-15 07:53:28
你指用异丙醇或者乙醇沉淀时看不到？有可能是样品量比较少，你定量RNA了吗？还有就是纯净的核酸是透明的，往往看不太到。一般的样品里有一些盐和其它杂质，所以会出现白色沉淀。晾干样品后就会发现白色的沉淀变得透 ...

我没有做定量，就是用异丙醇和以纯沉淀时看不到沉淀，还有就是最后酒精的挥发一般怎样做到快速有效呢
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-15 22:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励跟贴交流！ 2013-05-19 16:53:01
引用回帖:
5楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-15 22:39:14
我没有做定量，就是用异丙醇和以纯沉淀时看不到沉淀，还有就是最后酒精的挥发一般怎样做到快速有效呢...

大概是样品量少看不到吧。你的电泳上了多少微升？一般干燥沉淀时就是放在桌子上就可以了。虽然有人用speed vac，我不是很喜欢。如果能看到沉淀，等白色沉淀变成透明就可以了。干燥时间根据沉淀多少会有些不同。一般就是半个小时，不用特别长，非常干的核酸也不是很好溶解。
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-15 23:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsq0315

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-15 23:42:20
大概是样品量少看不到吧。你的电泳上了多少微升？一般干燥沉淀时就是放在桌子上就可以了。虽然有人用speed vac，我不是很喜欢。如果能看到沉淀，等白色沉淀变成透明就可以了。干燥时间根据沉淀多少会有些不同。一般 ...

我点样用的5微升，结果第二天用3微升点样效果还没有5微升的好，这周打算在提一次
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-16 12:55:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励跟贴交流！ 2013-05-19 16:53:19
引用回帖:
7楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-16 12:55:27
我点样用的5微升，结果第二天用3微升点样效果还没有5微升的好，这周打算在提一次...

你用的什么方法提的？RNA质量不好有可能是内源RNase活性高或者提取时引入外源RNase，甚至电泳时都可能造成降解。
赞一下 回复此楼
8楼2013-05-17 08:27:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gsq0315

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-17 08:27:40
你用的什么方法提的？RNA质量不好有可能是内源RNase活性高或者提取时引入外源RNase，甚至电泳时都可能造成降解。...

我就用的是trzol试剂提的
赞一下 回复此楼
9楼2013-05-17 22:40:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2013-05-19 16:53:30
引用回帖:
9楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-17 22:40:27
我就用的是trzol试剂提的...

我也用TRIZOL提RNA，效果应该可以比这好。你的样品是新鲜的还是冻存的？有时候样品保存也可能造成RNA降解。
赞一下 回复此楼
10楼2013-05-18 00:45:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gsq0315 的主题更新
181/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学280分求调剂 +4 722865 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:01 by chixmc
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +11 手机用户 2026-03-17 12/600 2026-03-23 23:51 by 热情沙漠
[考研] 材料调剂 +3 匹克i 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:18 by peike
[考研] 材料292调剂 +4 橘颂思美人 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:16 by peike
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +5 葵梓卫队 2026-03-18 7/350 2026-03-23 16:26 by lingjue
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 307求调剂 +11 冷笙123 2026-03-17 11/550 2026-03-22 20:16 by edmund7
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 305分求调剂（食品工程） +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭