[求助] 原核生物 RNA提取

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附件 1 : RNA20130513.tif

2013-05-13 22:31:38, 1.97 M

1楼2013-05-13 22:31:50

cicelyzh

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
gsq0315(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-14 11:00:41

质量不好。23S和16S条带太暗，5S太亮，说明降解严重。

2楼2013-05-14 07:49:57

gsq0315

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2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-14 07:49:57
质量不好。23S和16S条带太暗，5S太亮，说明降解严重。

在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊

3楼2013-05-14 13:26:28

cicelyzh

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【答案】应助回帖

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gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-19 16:52:41

引用回帖:

3楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-14 13:26:28
在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊

...

你指用异丙醇或者乙醇沉淀时看不到？有可能是样品量比较少，你定量RNA了吗？还有就是纯净的核酸是透明的，往往看不太到。一般的样品里有一些盐和其它杂质，所以会出现白色沉淀。晾干样品后就会发现白色的沉淀变得透明了。

4楼2013-05-15 07:53:28

gsq0315

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4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-15 07:53:28
你指用异丙醇或者乙醇沉淀时看不到？有可能是样品量比较少，你定量RNA了吗？还有就是纯净的核酸是透明的，往往看不太到。一般的样品里有一些盐和其它杂质，所以会出现白色沉淀。晾干样品后就会发现白色的沉淀变得透 ...

我没有做定量，就是用异丙醇和以纯沉淀时看不到沉淀，还有就是最后酒精的挥发一般怎样做到快速有效呢

5楼2013-05-15 22:39:14

cicelyzh

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【答案】应助回帖

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gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励跟贴交流！ 2013-05-19 16:53:01

引用回帖:

5楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-15 22:39:14
我没有做定量，就是用异丙醇和以纯沉淀时看不到沉淀，还有就是最后酒精的挥发一般怎样做到快速有效呢

...

大概是样品量少看不到吧。你的电泳上了多少微升？一般干燥沉淀时就是放在桌子上就可以了。虽然有人用speed vac，我不是很喜欢。如果能看到沉淀，等白色沉淀变成透明就可以了。干燥时间根据沉淀多少会有些不同。一般就是半个小时，不用特别长，非常干的核酸也不是很好溶解。

6楼2013-05-15 23:42:20

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6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-15 23:42:20
大概是样品量少看不到吧。你的电泳上了多少微升？一般干燥沉淀时就是放在桌子上就可以了。虽然有人用speed vac，我不是很喜欢。如果能看到沉淀，等白色沉淀变成透明就可以了。干燥时间根据沉淀多少会有些不同。一般 ...

我点样用的5微升，结果第二天用3微升点样效果还没有5微升的好，这周打算在提一次

7楼2013-05-16 12:55:27