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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核生物 RNA提取
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gsq0315

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核生物 RNA提取

第一次刚提取的革兰氏阴性共生菌RNA,不知结果怎样，求高手指点。
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  • 附件 1 : RNA20130513.tif
    • 2013-05-13 22:31:38, 1.97 M

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1楼 2013-05-13 22:31:50
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励跟贴交流！ 2013-05-19 16:53:19
引用回帖:
7楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-16 12:55:27
我点样用的5微升，结果第二天用3微升点样效果还没有5微升的好，这周打算在提一次...

你用的什么方法提的？RNA质量不好有可能是内源RNase活性高或者提取时引入外源RNase，甚至电泳时都可能造成降解。
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8楼2013-05-17 08:27:40
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gsq0315(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-14 11:00:41
质量不好。23S和16S条带太暗，5S太亮，说明降解严重。
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2楼2013-05-14 07:49:57
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gsq0315

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-14 07:49:57
质量不好。23S和16S条带太暗，5S太亮，说明降解严重。

在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊
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3楼2013-05-14 13:26:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-19 16:52:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-14 13:26:28
在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊...

你指用异丙醇或者乙醇沉淀时看不到？有可能是样品量比较少，你定量RNA了吗？还有就是纯净的核酸是透明的，往往看不太到。一般的样品里有一些盐和其它杂质，所以会出现白色沉淀。晾干样品后就会发现白色的沉淀变得透明了。
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4楼2013-05-15 07:53:28
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