应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母转化验证
81/1返回列表
查看: 641  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] 酵母转化验证 已有1人参与

大家好，最近有个事情很郁闷。把质粒转到酵母后，做质粒PCR，居然有好多条带。而在转酵母之前就只有单一条带啊，不知道为什么，到底哪里出了问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-26 22:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
木有人回答么。。。
回复此楼
2楼2013-05-03 16:43:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你说的转到酵母之后的质粒PCR是指提取酵母质粒之后为模版PCR吗？还是怎样
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-03 23:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 意孤城_ at 2013-05-03 23:07:16
你说的转到酵母之后的质粒PCR是指提取酵母质粒之后为模版PCR吗？还是怎样

就是提取酵母质粒之后为模版做PCR
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-04 21:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-06 02:22:01
引用回帖:
4楼: Originally posted by piaoyunokok at 2013-05-04 21:59:15
就是提取酵母质粒之后为模版做PCR...

可能是纯度不高，建议吧提取的酵母质粒转化到细菌中提质粒在做PCR看看。如果你是单转一个载体到酵母里面出现这种情况有点费解，如果是2个或者更多就很容易理解了。
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-05 11:28:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 意孤城_ at 2013-05-05 11:28:35
可能是纯度不高，建议吧提取的酵母质粒转化到细菌中提质粒在做PCR看看。如果你是单转一个载体到酵母里面出现这种情况有点费解，如果是2个或者更多就很容易理解了。...

转过一次，但是没长出来。不知道是不是质粒浓度太低了。从酵母里面提取的质粒跑电泳能有条带么？
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-05 23:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意孤城_

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by piaoyunokok at 2013-05-05 23:23:20
转过一次，但是没长出来。不知道是不是质粒浓度太低了。从酵母里面提取的质粒跑电泳能有条带么？...

基本上看不到，我提酵母质粒浓度基本上维持在10ng/ul（3ML菌提完后30ul水溶），如果跑胶很难看到的（我没跑过，用机子测得），转化加5ul（要复苏）能长很多。如果你提酵母质粒没问题的话，估计就是杂菌污染或者是提的就不是质粒
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-06 11:23:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 意孤城_ at 2013-05-06 11:23:28
基本上看不到，我提酵母质粒浓度基本上维持在10ng/ul（3ML菌提完后30ul水溶），如果跑胶很难看到的（我没跑过，用机子测得），转化加5ul（要复苏）能长很多。如果你提酵母质粒没问题的话，估计就是杂菌污染或者是提 ...

额？好吧。。。。在提吧
回复此楼
8楼2013-05-06 15:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 piaoyunokok 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭