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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] 酵母转化验证 已有1人参与

大家好,最近有个事情很郁闷。把质粒转到酵母后,做质粒PCR,居然有好多条带。而在转酵母之前就只有单一条带啊,不知道为什么,到底哪里出了问题?
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意孤城_

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by piaoyunokok at 2013-05-05 23:23:20
转过一次,但是没长出来。不知道是不是质粒浓度太低了。从酵母里面提取的质粒跑电泳能有条带么?...

基本上看不到,我提酵母质粒浓度基本上维持在10ng/ul(3ML菌提完后30ul水溶),如果跑胶很难看到的(我没跑过,用机子测得),转化加5ul(要复苏)能长很多。如果你提酵母质粒没问题的话,估计就是杂菌污染或者是提的就不是质粒
7楼2013-05-06 11:23:28
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

木有人回答么。。。
2楼2013-05-03 16:43:10
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意孤城_

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你说的转到酵母之后的质粒PCR是指提取酵母质粒之后为模版PCR吗?还是怎样
3楼2013-05-03 23:07:16
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 意孤城_ at 2013-05-03 23:07:16
你说的转到酵母之后的质粒PCR是指提取酵母质粒之后为模版PCR吗?还是怎样

就是提取酵母质粒之后为模版做PCR
4楼2013-05-04 21:59:15
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