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安小安4302

铁虫 (正式写手)

[求助] 求助两个菌落pcr模板的问题!!!!

求大家帮忙!
转化做完了,菌挑了,
要做两个pcr
第一个是用载体上的引物做一个菌落pcr
第二个是用特异引物做一个菌落pcr
我不知道着两个pcr的模板都是用菌液,还是第二个用第一个的产物做模板?
谢谢大家了!!!!
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robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
安小安4302: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-04-20 08:52:06
都是用菌液, maybe you only need do one of them.
immunologyparasite
2楼2013-04-19 23:08:42
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gwbk

木虫 (正式写手)

都用菌液,如果构建在载体上的DNA片段是大肠杆菌序列,又转化回大肠杆菌时,可以提质粒做模板(避免PCR时大肠杆菌基因组影响载体上的序列,假阳性),特异引物验证,当然也可以做载体引物PCR
3楼2013-04-20 09:13:54
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