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安小安4302

铁虫 (正式写手)

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性别: MM
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[求助] 求助两个菌落pcr模板的问题！！！！

求大家帮忙！
转化做完了，菌挑了，
要做两个pcr
第一个是用载体上的引物做一个菌落pcr
第二个是用特异引物做一个菌落pcr
我不知道着两个pcr的模板都是用菌液，还是第二个用第一个的产物做模板？
谢谢大家了！！！！

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不要因为走的太远，以至于忘记了为什么出发！

1楼2013-04-19 21:38:22

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robustli

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
安小安4302: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-04-20 08:52:06

都是用菌液, maybe you only need do one of them.

immunologyparasite

2楼2013-04-19 23:08:42

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gwbk

木虫 (正式写手)

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都用菌液，如果构建在载体上的DNA片段是大肠杆菌序列，又转化回大肠杆菌时，可以提质粒做模板（避免PCR时大肠杆菌基因组影响载体上的序列，假阳性），特异引物验证，当然也可以做载体引物PCR

3楼2013-04-20 09:13:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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