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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 普通的PCR，一样的体系、程序，为什么结果不同？
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na466433306

金虫 (小有名气)

[交流] 普通的PCR，一样的体系、程序，为什么结果不同？

最近做了很多PCR，差不多所有结果都出来之后，要回头来把所有PCR产物回收，可是却发现，条带和以前不一样了，是怎么回事呢？
有时候甚至一条条带都没有了，特别伤心啊，除了东西少加了什么的，还有什么原因会这样呢？
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1楼 2013-04-18 21:31:50
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chjinzhi

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
na466433306: 金币+1 2013-04-19 19:24:04
na466433306: 金币+1 2013-04-19 19:24:41
你回收后有没有跑过电泳验证一下呢？
或者说你的引物是不是质量不太好？
再者有没有可能是你胶回收时操作不对使得一些试剂的含量过高或存在残留，影响下游实验？
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6楼2013-04-19 10:35:20
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爱上文慧

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-19 08:22:59
na466433306: 金币+1 2013-04-19 19:19:50
我以前也出现过这种问题，后来重新做，直到条带正确，如果你找到原因告诉我哈，谢谢谢谢
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2楼2013-04-18 22:44:05
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新人小玥

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
na466433306(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-19 08:22:36
na466433306: 金币+1 2013-04-19 19:21:57
一条条带都没了，什么意思？条带不一样可能是在回收的时候发生了降解，或者根本就是第一次跑胶时就没跑开。
如果是再做一次PCR，没有的话，问题可能出在模板上。有的基因本身就很少，很难被扑获到，有点碰运气。或者是模板提取过程中没有纯化干净，容易降解。
除了这些常见的原因，我相信还有很多其它的原因，要纠结也没啥意思，还不如重做呢
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3楼2013-04-18 23:59:36
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gzl9901

铁杆木虫 (文坛精英)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
na466433306: 金币+1 2013-04-19 19:22:08
祝顺利,科研成果累累！！
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4楼2013-04-19 00:42:37
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