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普通的PCR,一样的体系、程序,为什么结果不同?
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na466433306
金虫
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(幼儿园)
金币: 888.3
帖子: 85
在线: 38.8小时
虫号: 1694045
[交流]
普通的PCR,一样的体系、程序,为什么结果不同?
最近做了很多PCR,差不多所有结果都出来之后,要回头来把所有PCR产物回收,可是却发现,条带和以前不一样了,是怎么回事呢?
有时候甚至一条条带都没有了,
特别伤心啊,除了东西少加了什么的,还有什么原因会这样呢?
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2013-04-18 21:31:50
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na466433306: 金币+1
2013-04-19 19:22:08
祝顺利,科研成果累累!!
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2013-04-19 00:42:37
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爱上文慧
银虫
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天
2013-04-19 08:22:59
na466433306: 金币+1
2013-04-19 19:19:50
我以前也出现过这种问题,后来重新做,直到条带正确,如果你找到原因告诉我哈,谢谢谢谢
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2楼
2013-04-18 22:44:05
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na466433306(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天
2013-04-19 08:22:36
na466433306: 金币+1
2013-04-19 19:21:57
一条条带都没了,什么意思?条带不一样可能是在回收的时候发生了降解,或者根本就是第一次跑胶时就没跑开。
如果是再做一次PCR,没有的话,问题可能出在模板上。有的基因本身就很少,很难被扑获到,有点碰运气。或者是模板提取过程中没有纯化干净,容易降解。
除了这些常见的原因,我相信还有很多其它的原因,要纠结也没啥意思,还不如重做呢
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3楼
2013-04-18 23:59:36
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na466433306: 金币+1
2013-04-19 19:22:49
以前试过换一台PCR仪就不行的。前天试过从10uL扩大到15uL就不行的。lz是不是有什么细节和以前的条件不一样了?
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5楼
2013-04-19 09:03:02
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