应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母表达 转化子PCR验证
101/1返回列表
查看: 2584  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sunny_andy

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母表达 转化子PCR验证

做酵母表达，电转后挑转化子验证，直接菌落PCR, 或是冻融法 先挑了20几个转化子都没有P出来条带  难道假阳性这么高？ 有什么好的方法验证？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-18 13:41:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunny_andy(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-05-02 02:19:28
前几天就是直接PCR验证的，条带比较明显，也没去设计alpha factor和目的基因中间的引物，直接扩目的基因，然后就做验证了
赞一下 回复此楼
一花一世界、一叶一菩提
2楼2013-04-18 14:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunny_andy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 乐乐3952 at 2013-04-18 14:12:23
前几天就是直接PCR验证的，条带比较明显，也没去设计alpha factor和目的基因中间的引物，直接扩目的基因，然后就做验证了

体系和条件是怎样的呢？
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-18 14:30:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sunny_andy at 2013-04-18 14:30:31
体系和条件是怎样的呢？...

直接挑取的转化子进行PCR了，体系还是最初的反应体系
赞一下 回复此楼
一花一世界、一叶一菩提
4楼2013-05-02 09:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-10 09:50:32
菌落PCR有阳性对照吗。
菌落最好裂解处理
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-02 11:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-10 09:50:38
进行PCR的用的是什么酶呢？？
如果用的是普通的PCR MIX
应该先要裂解，再进行PCR
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-02 12:26:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jdhdragon

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-10 09:50:44
我是菌液离心用ddH2O重悬，取1微升进行扩增，扩增时候先94度10分钟后再进入PCR指数扩增循环，一般效果还不错。你可以参考一下。
赞一下 回复此楼
7楼2013-09-09 22:33:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

84146922

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jdhdragon at 2013-09-09 22:33:03
我是菌液离心用ddH2O重悬，取1微升进行扩增，扩增时候先94度10分钟后再进入PCR指数扩增循环，一般效果还不错。你可以参考一下。

请问用的是酶是普通的酶吗？
PCR mix?
赞一下 回复此楼
8楼2013-09-10 08:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunny_andy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 84146922 at 2013-09-10 08:59:22
请问用的是酶是普通的酶吗？
PCR mix?...

是的
回复此楼
9楼2013-09-10 09:18:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄太帝

新虫 (正式写手)
楼主 你当年解决了这个问题吗 我现在也碰到这种问题 求教啊！
赞一下 回复此楼
做只快乐的小虫 快乐得学习
10楼2018-04-11 17:12:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunny_andy 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭