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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » his蛋白标签 his标签自己扩效果怎样？
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drh34

铜虫 (小有名气)

[求助] his蛋白标签 his标签自己扩效果怎样？

his标签可以扩效果怎样？有人做植物稳定转化改造过带标签的载体？非常感谢
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1楼 2013-04-16 21:42:41
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xy656691

金虫 (正式写手)
l楼主再说清楚些

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2013-04-17 00:07:20
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以通过设计引物自己把his-tag融合到目标蛋白的C端或者N端。
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3楼2013-04-17 00:43:09
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drh34

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-17 00:43:09
可以通过设计引物自己把his-tag融合到目标蛋白的C端或者N端。

能详细一点吗？表达后要回收检测蛋白活性，新手，实验室以往也没有做。
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4楼2013-04-18 09:59:45
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drh34

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xy656691 at 2013-04-17 00:07:20
l楼主再说清楚些

自己在带his标签的载体上拿到的序列合成挂载体上有木有问题？
在植物稳定表达载体上带蛋白标签，有前辈做过么？能详细说一下吗？
邮箱：dr.34@163.com
非常感谢。
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5楼2013-04-18 10:08:56
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xy656691: 金币+5, 感谢 2013-04-18 13:44:29
引用回帖:
4楼: Originally posted by drh34 at 2013-04-18 09:59:45
能详细一点吗？表达后要回收检测蛋白活性，新手，实验室以往也没有做。...

his-tag蛋白是否有活性要看不同蛋白，一般来说his-tag不影响蛋白活性，但是需要自己实验验证。如果蛋白N端有信号肽什么的，一般只能把tag加在C端。
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6楼2013-04-18 12:02:32
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xy656691

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by drh34 at 2013-04-18 10:08:56
自己在带his标签的载体上拿到的序列合成挂载体上有木有问题？
在植物稳定表达载体上带蛋白标签，有前辈做过么？能详细说一下吗？
邮箱：dr.34@163.com
非常感谢。...

没有做过在植物体内的
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7楼2013-04-18 13:44:16
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drh34

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-18 12:02:32
his-tag蛋白是否有活性要看不同蛋白，一般来说his-tag不影响蛋白活性，但是需要自己实验验证。如果蛋白N端有信号肽什么的，一般只能把tag加在C端。...

谢谢
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8楼2013-04-18 16:48:46
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