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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

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[交流] 引物酶切位点问题已有6人参与

大家好，我要做克隆表达，但是设计的引物没有加酶切位点，做TA克隆的话会不会比较麻烦？有没有比较好的方法改进啊？一般克隆载体大家用什么载体啊？还有表达载体大家又用什么呢？

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思路决定出路。。。

1楼 2013-04-01 14:11:45

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Leo_xin

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by lmcyjxs at 2013-04-02 21:03:18
哦，谢谢你哦~
我第一次搞引物设计，拿去合成了，才知道最好加上酶切位点，我是需要做克隆表达的，那么照你这么说，之前没加酶切位点，做表达的时候再设计引物就好了，就是麻烦一些。
而与克隆载体连接时，只要用 ...

方向会有正反向，但你克隆到载体上，肯定要测序，测序前可以菌检来测试方向，把正方向阳性的送测便可（直接送阳性克隆也是可以的，到时候选取正确的那个克隆就好）我这边做TA克隆 pMD18连接效率挺高的，不用怕