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PCR有弥散带
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咆哮的白菜
金虫
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注册: 2010-08-13
性别: GG
专业: 植物病理学
[
求助
]
PCR有弥散带
已有1人参与
如图为我的PCR电泳图,前六个与后六个只有引物不同,前六个(从左到右)为不带酶切位点的引物,后六个为带酶切位点引物。前六个有目的带,如箭头所示,但是很弱,后六个全部为抹带。
pcr条件为:94 1min
梯度退火(55-60) 30s
72 140s 35个循环
目的片段大小约2500bp。
求教为什么会出现这么严重的弥散,为什么后六个只有弥散呢?很郁闷……
改怎样改进pcr条件呢?
IMG_0547GGG.jpg
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谁做过双链RNA的RT-PCR
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姥姥不疼,舅舅不爱
1楼
2013-03-14 17:00:42
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zhang宇微
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专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★
咆哮的白菜: 金币+1,
★
有帮助, 主要是看长相
2014-01-21 13:33:59
上样量太大也不行
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8楼
2014-01-21 09:28:19
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专业: 微生物生理与生物化学
引用回帖:
9楼
:
Originally posted by
咆哮的白菜
at 2014-01-21 13:36:09
谢谢这位妹子把我一年前的帖子翻出来,让我好好怀念一下以前的PCR岁月,虽然你没说中问题根本(最后是落脚在模板量问题上),但是看在妹子这么敬业的态度上(其实主要是看长相
),给分!...
。。不是的我是来看基因敲除的,我的长相怎么了!!!!!我也是有姿势的!!!!!!
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10楼
2014-01-21 19:41:27
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