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1989zb

金虫 (小有名气)

[求助] pcr目的条带暗,怎么办呢??

最近一直pcr,可是目的条带总是很暗,该怎么优化条件呢?而且在胶回收后用同样的条件跑,连条带都没有,目的片段大小1500bp
反应条件:94度 4min 94度 30s  52度30s  72 度 90s  72度10min  
该怎么优化呢??

未命名.jpg



胶回收稀释后pcr.jpg
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生物大虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
非特异性条带太多并且很亮,我看了一下你的退火温度有点低,摸索PCR条件还不如重新设计引物
谋事在人成事在天
7楼2013-03-11 14:38:33
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