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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 设计引物的问题。
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[求助] 设计引物的问题。

我要扩增一个ORF然后表达，想问的是ATG必须要包含在引物i吗？在ATG之前的几个碱基连到载体上反正也不会表达的吧
其他还有那些要注意的，没啥经验，谢谢！
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Only the strong survive.
1楼 2013-03-09 23:24:55
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在genebank找到基因的CDS区，设计引物包括ATG和TAA就可以了，如果需要加酶切位点，在引物5‘端加！
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寻找真正的自我！
3楼2013-03-10 08:32:26
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看你的构建啊，前面有没有tag啥的，反正扩增时候基本都会有ATG（当然也可能GTG）的, 另外注意起始密码子前面一小段里面肯定有rbs序列，另外如果不是用现成载体的话，启动子和rbs间不要有太多不翻译序列。
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2楼2013-03-10 02:49:37
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