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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[求助] 设计引物的问题。

我要扩增一个ORF然后表达,想问的是ATG必须要包含在引物i吗?在ATG之前的几个碱基连到载体上反正也不会表达的吧
其他还有那些要注意的,没啥经验,谢谢!
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你的构建啊,前面有没有tag啥的,反正扩增时候基本都会有ATG(当然也可能GTG)的, 另外注意起始密码子前面一小段里面肯定有rbs序列,另外如果不是用现成载体的话,启动子和rbs间不要有太多不翻译序列。
2楼2013-03-10 02:49:37
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在genebank找到基因的CDS区,设计引物包括ATG和TAA就可以了,如果需要加酶切位点,在引物5‘端加!
寻找真正的自我!
3楼2013-03-10 08:32:26
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